上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-06 10:02:47瀏覽次數(shù):493
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人外周血淋巴細(xì)胞系;MC/CAR 的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 人外周血淋巴細(xì)胞系;MC/CAR
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞是由Ritts RE J從一名81歲白人男性漿細(xì)胞瘤患者外周血分離并建立。該細(xì)胞能夠表達(dá)免疫球蛋白,但沒有分泌能力,細(xì)胞表面也未檢測出免疫球蛋白。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
細(xì)胞介紹
隨著轉(zhuǎn)基動物與生物反應(yīng)器的研究,雞輸卵管生物反應(yīng)器成為繼哺乳動物生物反應(yīng)器之后的又一研究熱點(diǎn)。禽類輸卵管不僅運(yùn)送配子,而且是形成卵白、殼膜、蛋殼的場所。雞輸卵管上皮細(xì)胞具有合成和分泌卵蛋白的功能,其生理位置及重要的生理功能使其成為外源基特異性檢測到*。
細(xì)胞特性
1)來源:新生小雞
2)含量:>1x106 個/mL
3)鑒定:cytokeratin 18 角蛋白和卵白蛋白(oalbumin)抗體免疫熒光法
4)純度:>85%
5)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
6)規(guī)格:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
運(yùn)輸和保存:T25培養(yǎng)瓶常溫運(yùn)輸。
細(xì)胞使用:僅供科研使用。
細(xì)胞系{人源細(xì)胞系}
人肺癌細(xì)胞
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞系由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的。
細(xì)胞特性
1)來源:肺癌
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉谩?nbsp;
人肺腺癌細(xì)胞
細(xì)胞介紹
該患者為25歲白人男性,已經(jīng)用、爭光霉素、進(jìn)行過治療。
細(xì)胞特性
1) 來源:肺
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
人肺成纖維細(xì)胞
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞為穩(wěn)定二倍體細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1)來源:肺
2)形態(tài):成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
人肺鱗癌細(xì)胞
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞1987年建系,源自一位54歲患有非小細(xì)胞肺癌的白人男性,該患者為吸煙者。
細(xì)胞特性
1) 來源:肺癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性