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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供人皮膚成纖維細胞；HSAS4
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細胞名稱  人皮膚成纖維細胞；HSAS4  
形態(tài)特性   成纖維細胞樣　  
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細胞系來源于一男性的皮膚組織。2005年由昆明細胞庫建立。   
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS  
傳代方法   1：2傳代；3-4天一次  
傳代情況  P2  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測  熒光法（-）　  
STR   Amelogenin：XY；D8S1179：11,13；D21S11：29,31；D7S820：10,11；CSF1PO：10,13；D3S1358：16；TH01： 9；D13S317：8，11；D16S539： 12；D2S1338：20,21；D19S433：13；vWA：14,18；THOX：8, 11；D18S51：15,17；D5S818：11, 12；FGA：21,24。  
同工酶    
染色體    

使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
重塑基質(zhì)的表型，同時，它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應(yīng)對修復(fù)時的炎癥反應(yīng)。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。  
2)細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（imentin）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
角質(zhì)形成細胞  
細胞詳述  
角質(zhì)形成細胞是一種不斷分化的復(fù)層鱗狀上皮細胞，其分化的zui終階是形成角蛋白。根據(jù)角質(zhì)形成細胞的發(fā)展階段和特點，從內(nèi)向外可將其分為五層?；准毎麑佑址Q生發(fā)層，棘細胞層，顆粒層，透明層，角質(zhì)層。  
角質(zhì)形成細胞的分化成熟表現(xiàn)為從基底層到向角質(zhì)層的逐漸移行。在單一移行過程中，角質(zhì)形成;細胞的形狀和功能也逐漸發(fā)生著變化，從單層柱狀上皮的基底層到扁平的細胞核消失的角質(zhì)層。新生的基底細胞進入棘細胞層，然后上移到顆粒層的zui上層。  
化過程的有效的模型。  
細胞特性  
1)細胞來源于實驗動物正常肌肉組織。  
2)細胞鑒定：肌動蛋白（α-actin）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：長梭狀細胞，貼壁培養(yǎng)。  
骨骼肌成纖維細胞  
細胞詳述  
肌肉可分為肌腹和肌腱，其中兩端較細呈乳白色的部分為肌腱，呈索條或扁帶狀，由平行的膠原纖維束構(gòu)成，色白，有光澤，但無收縮能力，腱附著于骨處與骨膜牢固地編織在一起，屬于結(jié)締組織，同時，肌腹的表面包以結(jié)締組織性外膜，向兩端則與肌腱組織融合在一起，這些結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成，具有支持、連接、保護和營養(yǎng)功能。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常腿部肌肉組織。  
2)細胞鑒定：波形蛋白（imentin）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
纖維環(huán)細胞  
細胞詳述  
纖維環(huán)，位于椎間盤的周緣部，由纖維軟骨組成，纖維環(huán)的纖維在椎體間斜行，在橫切面上排列成同心環(huán)狀，相鄰環(huán)的纖維具有相反的斜度，而相互交叉。纖維環(huán)細胞位于膠原纖維束之前，合成和分泌纖維環(huán)細胞外基質(zhì)，維持正常的纖維環(huán)結(jié)構(gòu)和功能。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常椎間盤組織。  
2)細胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型膠原(Collagen Ⅰ)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：多角形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
髓核細胞  
細胞詳述  
髓核是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。髓核細胞的過早衰老與凋亡是導致椎間盤退行性變過程的主要原之一，主要表現(xiàn)為退變椎間盤內(nèi)髓核細胞功能降低和數(shù)量減少，使得其Ⅱ型膠蛋白聚糖等基質(zhì)分泌量下降，zui終導致椎間盤維持脊柱高度、承受各方應(yīng)力等生物力學功能喪失。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常椎間盤組織。  
2)細胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：梭形或多角形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
破骨細胞  
細胞詳述  
破骨細胞(osteoclast，亦稱bone-resorbing cells)是骨組織成分的一種，行使骨吸收（bone resorption）的功能。破骨細胞與成骨細胞（osteoblast，亦稱bone-forming cells）在功能上相對應(yīng)。二者協(xié)同，在骨骼的發(fā)育和形成過程中發(fā)揮重要作用。高表達的抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase)和組織蛋白酶K（cathepsin K)是破骨細胞主要標志。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常關(guān)節(jié)組織。  
2)細胞鑒定：抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：圓形，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
皮膚成纖維細胞  
細胞詳述  
成纖維細胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細胞。由于這些細胞非常容易培養(yǎng)，它們已被廣泛用于細胞和分子生物學研究中。一般而言，成纖維細胞能夠分泌I型和III型膠原等細胞外基質(zhì)，并且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時，真皮成纖維細胞由可增殖，可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的，可