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公司是*的ATCC細胞供應商，提供人臍靜脈內皮細胞系；HUVEC-T/T的報價，咨詢，稱技術服務，咨詢選購。
細胞名稱  人臍靜脈內皮細胞系；HUVEC-T/T  
形態(tài)特性   上皮樣  
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS　  
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次  
傳代情況  C5  
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    
使用權限  未定 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質與體內基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
中文名稱：預染彩虹蛋白marker (11-180KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產品簡介：  
本產品包含10種彩色預染的已知分子量標準蛋白，分子量范圍為11kD-180kD，每種蛋白含量約為0.2-0.4mg/ml。預染marker可以用于直接觀察蛋白質電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉膜效果。SDS-PAGE凝膠電泳或轉移到PDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶，其中25kD為綠色條帶，75kD為紅色條帶，其余8條是藍色條帶。  
產品特點：  
三色預染，顏色鮮亮，條帶整齊，便于觀察。  
穩(wěn)定性能突出，檢測4℃放置兩年無明顯降解。  
用量少，節(jié)約成本，僅5ul即可*呈現(xiàn)（1.5mm，10孔梳）。  
廣譜多帶，一支即可滿足多種實驗需求。  
注意事項：   
1.本產品含有較高濃度甘油，常規(guī)-20℃保存為液體狀態(tài)，可直接使用。若冰箱溫度不穩(wěn)，導致結冰，可適當分裝后置于4℃保存，至少穩(wěn)定6個月。  
2.Marker分離效果與PAGE膠濃度相關，若分離膠濃度低于15%，25kD以下條帶不易分離，但不影響綠色（25KD）及以上條帶。如果目的條帶小于25KD，建議分離膠濃度大于或等于15%。  
3.轉膜效果與轉膜時間有關，需根據(jù)客戶目的條帶大小而定，如果轉膜后較大分子量條帶有部分未轉膜成功，屬于正常現(xiàn)象。  
儲存條件：  
-20℃保存，有效期至少2年。  
中文名稱：預染彩虹蛋白marker (40-300 KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產品簡介：  
本產品為三色預染蛋白分子量標準，由分子量從40 kDa到300 kDa的8種高純度預染蛋白質組成，其中70 kDa和300 kDa條帶為橙色，50 kDa條帶為綠色，其余條帶為藍色。  
本產品適合應用于SDS-PAGE時觀察蛋白電泳情況， Western Blot時判斷蛋白轉移效率，以及SDS-PAGE和Western Blot時的蛋白分子量標準。  
本產品以凝膠上樣緩沖液形式提供，緩沖液成分為：62.5mM Tris-H3PO4 (pH 7.5)，1mM EDTA，2%(w/) SDS，10mM DTT，1mM NaN3以及33%(/) glycerol，直接使用，無需加熱。上樣量根據(jù)凝膠厚度和大小而定，請參考說明書中的使用方法。  
產品特點：  
1. 八條帶組成的蛋白Marker分子量范圍廣泛；  
2. 與蛋白印跡膜具有親和性，可以監(jiān)測Western blot實驗中的轉膜效率；  
3. 50 kDa綠色條帶、70 kDa和300 kDa橙色條帶組合便于實時觀察電泳進程、判斷蛋白分子量。  
中文名稱：預染蛋白Marker(BIO-RAD)  
英文名字：Precision Plus Protein Dual Color Standards alue Pack  
分子式：分子量： 預染蛋白MARKER(BIO-RAD)的溶解性，預染蛋白MARKER(BIO-RAD)在水中的溶解性，預染蛋白MARKER(BIO-RAD)在生理鹽水中的溶解性，預染蛋白MARKER(BIO-RAD)在PBS緩沖液中的溶解性，預染蛋白MARKER(BIO-RAD)在DMSO、乙醇等有機溶劑中的溶解性，預染蛋白MARKER(BIO-RAD)在細胞實驗方面的應用，預染蛋白MARKER(BIO-RAD)在大鼠等動物實驗方面的應用。  
中文名稱：預染超低分子量蛋白Marker(3.3kD-31.0kDDa)  
英文名字：Ultra LowMolecular Weight Protein Marker  
產品簡介：  
預染超低分子量蛋白質Marker為蛋白質和多肽混合物的凍干粉，每種預染蛋白含量約為40mg，配有一支1×上樣緩沖液。  
使用說明:  
1.開封后，溶于200ml 1×上樣緩沖液，可根據(jù)需要進行小量分裝，每管10ml，-20℃貯存，每次取一管使用，避免反復凍融。  
2.使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。  
儲存條件：  
-20℃保存，有效期為一年。避免反復凍融，建議分裝凍存。  
中文名稱：預染彩虹蛋白marker (11-245KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產品簡介：  
本產品包含12種彩色預染的已知分子量標準蛋白，分子量范圍為11kD-245kD，每種蛋白含量約為0.2-0.4mg/ml。預染marker可以用于直接觀察蛋白質電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉膜效果。SDS-PAGE凝膠電泳或轉移到PDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶，其中25kD為綠色條帶，75kD為紅色條帶，其余10條是藍色條帶。  
產品特點：  
三色預染，顏色鮮亮，條帶整齊，便于觀察。  
穩(wěn)定性能突出，檢測4℃放置兩年無明顯降解。  
用量少，節(jié)約成本，僅5ul即可*呈現(xiàn)（1.5mm，10孔梳）。  
廣譜多帶，一支即可滿足多種實驗需求。