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細(xì)胞名稱(chēng)  永生化人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞系；ECDHCC-1  
形態(tài)特性   上皮樣  
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。   
培養(yǎng)條件    10%FBS  
傳代方法   無(wú)  
傳代情況  1:3傳代，3-4天傳1次  
凍存條件   C5  
支原體檢測(cè)  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
STR   陰性　  
同工酶    
染色體   未做 永生化人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞系；ECDHCC-1實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱(chēng)稱(chēng)量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動(dòng)物處死，用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下，以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類(lèi)染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
中文名稱(chēng)：GE中分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)(GE17-0615-01)  
英文名字：GE HMW-SDS Marker Kit  
描述及應(yīng)用：  
通過(guò)和標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)比，用SDS electrophoresis檢測(cè)未知樣品蛋白含量。  
特點(diǎn)：  
根據(jù)遷移距離，可得清晰的條帶。  
通過(guò)考馬斯亮藍(lán)法或銀染法，可得到肉眼可見(jiàn)的蛋白染色條帶。  
主要成分：  
兔肌球蛋白25 μg, 220000 (Mr)  
牛a-2-巨球蛋白: 100 μg, 170000 (Mr)  
大腸桿菌b-牛乳糖: 16 μg, 116000 (Mr)  
人轉(zhuǎn)鐵蛋白: 17 μg, 76000 (Mr)  
牛脫氫酶: 18 μg, 53000 (Mr)  
分子量檢測(cè)范圍：  
53-220kDa。  
儲(chǔ)存條件：  
4℃，密封儲(chǔ)存。  
中文名稱(chēng)：非預(yù)染超低分子量蛋白Marker(3.3-20.1kDa)  
英文名字：Ultra Low Molecular Weight Protein Marker  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品包含5種蛋白質(zhì)混合物，分子量范圍為3.3kD-20.1kD，條帶分別為：3.3，5.8，7.8，14.4，20.1。過(guò)SDS-PAGE電泳，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到分布均勻密度相近的5條帶?？梢杂脕?lái)判斷SDS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量。開(kāi)封后，可根據(jù)需要分裝成小管，建議每管分裝10μl，-20℃貯存，每次取一管使用。.本產(chǎn)品已含有了上樣緩沖液，使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳，上樣量5-10μl。注意：上樣前，蛋白樣品65℃預(yù)熱是必需的，否則電泳后一些蛋白會(huì)沉積在分離膠的上沿，出現(xiàn)一條蛋白雜帶。  
儲(chǔ)存條件：  
-20℃保存，有效期至少1年。  
中文名稱(chēng)：非預(yù)染低分子量蛋白Marker (14.4-97.4KDa)  
英文名字：Low Molecular Weight Protein Marker  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品為包含6種蛋白質(zhì)混合物的凍干粉，分子量范圍為14.4kD-97.4kD，每種蛋白的含量約為20-30μg。 過(guò)SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝膠）電泳后，用考馬斯亮藍(lán)染色可以得到分布均勻密度相近的6條帶?？梢杂脕?lái)判斷SDS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量。  
使用說(shuō)明：   
1. 開(kāi)封后，溶于400μL體積的1×蛋白上樣緩沖液（含β-巰基乙醇），于沸水浴中加熱5分鐘，冷卻后可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝，每管20μL，-20℃貯存，每次取一管使用。  
2. 如貯存后使用，使用前取分裝后的小管沸水浴預(yù)熱3-5分鐘后再上樣電泳，用考馬斯亮藍(lán)G-250染色后可見(jiàn)6條蛋。  
注意事項(xiàng)：  
建議分離膠濃度12%，濃縮膠濃度5%，制膠時(shí)先配制分離膠，聚合后再配制濃縮膠。電泳時(shí)，80電壓大約跑1小時(shí)后，待指示劑沿到達(dá)分離膠上沿時(shí)，將電壓調(diào)至120，直到電泳結(jié)束。整個(gè)電泳過(guò)程大約需3-4個(gè)小時(shí)。  
儲(chǔ)存條件：  
-20℃可保存至少一年。避免反復(fù)凍融，建議分裝保存。  
中文名稱(chēng)：藍(lán)色預(yù)染次高分子量蛋白Marker(43-200kDa)  
英文名字：Blue Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品包含5種預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)，分子量范圍為43kD-200kD，條帶分別為：43，66.2，97.4，130，220?？梢灾苯佑^察蛋白質(zhì)電泳及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)移效果。SDS-PAGE凝膠電泳后轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的5條藍(lán)色的蛋。  
使用說(shuō)明：  
1.開(kāi)封后，可根據(jù)需要分裝成小管，建議每管分裝10μl，-20℃貯存，每次取一管使用。  
2.本產(chǎn)品已含有了上樣緩沖液，使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳，上樣量5-10μl。  
3.建議分離膠濃度為7%-8%。  
注意事項(xiàng)：  
上樣前，蛋白樣品65℃預(yù)熱是必需的，否則電泳后一些蛋白會(huì)沉積在分離膠的上沿，出現(xiàn)一條蛋白雜帶。  
存儲(chǔ)條件：  
-20℃可保存至少一年。避免反復(fù)凍融，建議分裝凍存。