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細胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934  
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣  
生長特性  懸浮生長  
特征特性   該細胞系來自一成年彝族男性的外周血，昆明細胞庫于1993年通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS  
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次  
傳代情況  P10  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測  熒光法（-）　  
STR   -  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

分離范圍：70,000-40 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測定等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠6B  
英文名字：Sepharose 6B  
性狀：白色微球， 無嗅、無味  
凝膠類型：凝膠過濾填料,凝膠層析介質(zhì)  
結(jié)構(gòu)成分：6%交聯(lián)度瓊脂糖  
粒徑：45-165μm  
工作PH值：4-9  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：10,000-4 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠4B  
英文名字：Sepharose 4B  
性狀：白色微球，無嗅、無味  
凝膠類型：凝膠過濾填料,凝膠層析介質(zhì)  
結(jié)構(gòu)成分：4%交聯(lián)度瓊脂糖  
粒徑：45-165μm  
工作PH值：4-9  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：70,000-20 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等  
中文名稱：葡聚糖凝膠LH-60  
英文名字：Sephadex LH-60  
應(yīng)用：利用分子篩作用，適合用有機溶劑分離嗜脂性分子，可以非常濟地大規(guī)模制備各種天然產(chǎn)物；如：類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過濾填料，親脂型  
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)葡聚糖  
粒徑： 100-200目  
工作PH值：2-11  
操作溫度：4-40℃  
球蛋白分離范圍：400～20000  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)  
英文名字：Sephadex G-50  
應(yīng)用：利用分子篩作用，進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過濾填料，親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑：細顆粒20-80μm，中顆粒50-150μm，粗顆粒100-300μm  
工作PH值：2-10  
操作溫度：4-40℃  
球蛋白分離范圍：1500-30000  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)  
英文名字：Sephadex G-50  
中文名稱：葡聚糖凝膠G-25;交聯(lián)葡聚糖G-25(細顆粒)  
英文名字：Sephadex G-25  
應(yīng)用：利用分子篩作用，進行緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除小分子；工業(yè)脫鹽。  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過濾填料，親水型凝膠