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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（傣族）；KM9403的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（傣族）；KM9403  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞來(lái)源于一傣族女性的外周血。1994年由昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS  
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次  
傳代情況  P3  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測(cè)  熒光法（-）　  
STR   -  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
粒徑：60-200μm  
工作PH值：4-9  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：70,000-40 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測(cè)定等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠4FF  
英文名字：Sepharose 4FF  
性狀：白色微球, 無(wú)嗅、無(wú)味  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料；快流速，物理與化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。  
產(chǎn)品基質(zhì)：4％瓊脂糖  
粒徑：45-165μm  
工作PH值：3-13  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：70,000-20 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：巨大分子，病毒，疫苗的分離純化等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠6FF  
英文名字：Sepharose 6FF  
性狀：白色微球, 無(wú)嗅、無(wú)味  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料；快流速，物理與化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。  
產(chǎn)品基質(zhì)：6％瓊脂糖  
粒徑：45-165μm  
工作PH值：3-13  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：10,000-4 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：巨大分子，病毒，疫苗的分離純化等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠CL-4B  
英文名字：Sepharose CL-4B  
性狀：白色微球, 無(wú)嗅、無(wú)味  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料；反復(fù)交聯(lián)，化學(xué)與物理性質(zhì)更加穩(wěn)定。  
結(jié)構(gòu)成分：6%交聯(lián)度瓊脂糖  
粒徑：45-165μm  
工作PH值：3-13  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：10,000-4 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測(cè)定等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠CL-6B  
英文名字：Sepharose CL-6B  
性狀：白色微球，無(wú)嗅、無(wú)味  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料；反復(fù)交聯(lián)，化學(xué)與物理性質(zhì)更加穩(wěn)定。  
結(jié)構(gòu)成分：6%交聯(lián)度瓊脂糖  
粒徑：45-165μm  
工作PH值：3-13  
操作溫度：4-40℃  
分離范圍：10,000-4 ×106  
保存條件：4-8℃  
應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測(cè)定等  
中文名稱：瓊脂糖凝膠CL-2B  
英文名字：Sepharose CL-2B  
性狀：白色微球, 無(wú)嗅、無(wú)味  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料；反復(fù)交聯(lián)，化學(xué)與物理性質(zhì)更加穩(wěn)定。  
結(jié)構(gòu)成分：2%交聯(lián)度瓊脂糖  
粒徑：60-200μm  
工作PH值：3-13  
操作溫度：4-40℃