上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-08 13:31:13瀏覽次數(shù):400
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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-16 的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-16
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
英文名字:EZ-Buffers L HRP(Horseradish Peroxidaes) Buffer
用途及描述:科研試劑,Western Blot與ELISA
儲存條件: 18~25°C
中文名稱:GST 5 ml(預(yù)裝重力柱)
英文名字:GST-Sefinose 5 ml(Pre-Packed Graity Column)
特點:
1. Soluble recombinant protein with GST tag for the separation and purification, dissoled in high concentrations of denaturant inclusion body proteins can not be purified using this medium; specificity, the GST fusion protein with high affinity from bacterial brokenliquid step affinity purification can be obtained in a purity of more than 95% of the target protein; 3 on the medium-bound GST fusion protein, the solution of high concentrations of reduced glutathione (GSH) (33 mM) competition sexualelution. Different GST fusion protein is no need to fumble best of GSH elution concentration, make medium use more simple; 4. Renewable, and repeated use.
簡介:
日本血吸蟲來源的-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)是基工程重組蛋白設(shè)計和表達過程中一種常用的融合標簽。重組蛋白與GST融合后, 不僅穩(wěn)定性提高、可溶性增強, 而且為下游的分離純化帶來了地方便。GST分子量約為26 kDa, 與還原型(GSH)有*的親和力, 此可以利用固定化的GSH實現(xiàn)對GST融合蛋白的一步親和純化。 基質(zhì):高度交聯(lián)4%瓊脂糖; Aerage particle size:40~130 μm; pH Stability(工作):3~12。
用途及描述:科研試劑,蛋白純化與層析
儲存條件: 2~8°C
中文名稱:IMDM培養(yǎng)基
英文名字:IMDM medium
組分:
3.0 g/L,25 mM HEPES,2 mML-丙氨酰-
說明:
支持B-淋巴細胞、T-淋巴細胞、巨噬細胞的原祖細胞及絕大多數(shù)雜交細胞的體外培養(yǎng)。CO2濃度:8.5%;pH值:7.0~7.5; 滲透壓:274~302 mOsmol/kg;內(nèi)毒素:<0.005 EU/L;無菌:已檢測。
用途及描述:科研試劑,細胞培養(yǎng)基
儲存條件: 2~8°C
中文名稱:L-氨基酸氧化酶
英文名字:L-Amino acid oxidase >4 U/mg
簡介:
Crotalus adamanteus enom. Supplied as an aqueous solution with toluene added as a preseratie. The presence of substrate and absence of oxygen stabilize the enzyme at eleated temperatures. The enzyme may be reersibly inactiated by incubation at 38°C
用途及描述:科研試劑
儲存條件: 2~8°C
中文名稱:LB Lennox capsules
英文名字:LB Lennox- capsules
分子式: 分子量:
物理性狀及指標:
組分:………………………胰蛋白胨:10.0 g,酵母浸膏:5.0 g,NaCl:5.0 g
用途及描述:科研試劑,廣泛應(yīng)用于分子生物學。用于大腸桿菌的生存和增殖實驗
儲存條件:18~25°C,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:STET buffer
英文名字:STET buffer
物理性狀及指標:
組分:100 mM氯化鈉;10 mM Tris-HCL;1 mM EDTA; 5% Triton X-100
pH:………………………7.90~8.10 (25°C)
用途及描述:科研試劑
儲存條件:18~25°C避光防潮密閉干燥。
中文名稱:TB培養(yǎng)基(Terrific Broth)
英文名字:Terrific Broth
物理性狀及指標:
組分:……………………酪蛋白消化物:12.0 g,酵母浸出物:24.0 g,K2HPO4:9.4 g,KH2PO4:2.2 g
簡介:用于大腸桿菌分子遺傳菌株的制備,支持更高的細胞密度增加質(zhì)粒的產(chǎn)出。
用途及描述:科研試劑,廣泛應(yīng)用于分子生物學。用于大腸桿菌的生存和增殖;微生物實驗。
儲存條件:18~25°C,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)
英文名字:Mutarotase from Pig Kidney
物理性狀及指標:
外觀:……………………50%甘油的中性磷酸鹽緩沖液
活性:……………………> 50 U/mg
用途及描述:科研試劑,生化試劑。