上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-08 13:32:01瀏覽次數:395
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細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;HH-29
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一染色體畸變男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 47, XXY
使用權限 A類 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;HH-29 實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經平衡后離心8分鐘,速度為1000轉/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
保存條件
室溫保存1年;
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
中文名稱:4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷
英文名字:MU-Gal
分子式:C16H18O8 分子量:338.31
物理性狀及指標:
外觀:……………………白色粉末
熔點:……………………258~263°C
溶解性:…………………溶于水
熾灼殘留:………………<0.1%
純度:……………………>98%
用途及描述:科研試劑,本品是β-葡萄糖醛酸酶的熒光底物
儲存條件:-15~-20°C避光防潮密閉干燥。
中文名稱:5'-鹽(二水)
英文名字:Cytidine-5'-triphosphate(CTP) disodium salt dihydrate
分子式:C9H14N3Na2O14P3.2(H2O) 分子量:563.15
中文名稱:Alkaline transfer solution, 10x
英文名字:Alkaline transfer solution, 10x
用途及描述:科研試劑,包含4.0M NaOH.
儲存條件:18~25°C避光防潮密閉干燥。
中文名稱:CNBr活化瓊脂糖
英文名字:CNBr-Actiated Agarose
說明:
在規(guī)?;锌捎糜谂悸摵邪被亩嗵恰⒌鞍?、核酸、抗體以及其他物質。偶聯條件溫和、偶聯效率高,填料不需要處理,直接計算合適的量用于偶聯。保存時間長,4~8°C可以保存一年半,-20°C可以保存2年?;|:高度交聯4%瓊脂糖;平均顆粒大?。?0~130 μm;功能基團:CN;偶聯量:18-30 mgBSA/ml;偶聯條件:pH:8-10;溫度:4~45°C;時間1~16 h;可以在水相或者有機相中偶聯;zui大流速指標:300 cm/h,1 bar (100 kPa) 。儲存條件:2~8°C或-15~-20°C。
中文名稱:DEPC處理水(無DNA/RNA酶)
英文名字:DEPC treated ddH2O(RNase-free and DNase-free)
產品描述
用超純水DEPC處理后,再過高溫高壓滅菌而來。
產品優(yōu)勢
檢測無核酸酶和蛋白酶活性,可用于cDNA合成、體外轉錄、RNA提取等對核酸酶敏感的分子生物學試驗。
保存條件
室溫保存2個月。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
此試劑不可用于處理吸頭及容器,如果想處理吸頭及容器,可購買DEPC,按0.1%配制,混勻后浸泡,12小時后高溫高壓滅菌即可。
中文名稱:DNA, Sheared/Denatured, Fish Testes, Biotech Grade, 20 mg/ml Solution
英文名字:DNA, Sheared/Denatured, Fish Testes, Biotech Grade, 20 mg/ml Solution
說明:
An effectie blocking agent used to increase the signal-to-noise ratio for detection during hybridization.20 mg/ml Solution
A260/A280:………………>1.7
用途及描述:科研試劑,雜交液
中文名稱:EZ-Block A in PBS Solution
英文名字:EZ-Block A in PBS Solution
特點:
Adantages:(1) Lower background; (2) High sensitiity and specificity, simple procedure. Incubate the membranes in the BIO-BLOCK solution (about 2 ml/cm2) of membrane at 37°C for 15~30 minutes and rinse.
說明:
(Membrane Blocking Agent in 1x PBS), 0.5% Hammarsten Casein in 1 x PBS.A blocking buffer optimized for blocking non-specific binding sites on positiely charged nylon or PDF membranes in nucleic acids or protein blotting applications.
用途及描述:科研試劑,Western Blot與ELISA
中文名稱:EZ-Buffers L HRP(辣根過氧化物酶) Buffer