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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1008的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1008  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS  
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次  
傳代情況  P2  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測(cè)  熒光法（-）　  
STR   -  
同工酶    
染色體    
 使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
1中文名稱：藍(lán)色預(yù)染低分子量蛋白Marker(14.4-97.4kDa)  
英文名字：Blue Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品包含6種預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)，分子量范圍為14.4kD-97.4kD，條帶分別為：14.4，20.1，31，43，66.2，97.4，可以直接觀察蛋白質(zhì)電泳及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)移效果。SDS-PAGE凝膠電泳后轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的6條藍(lán)色的蛋。  
使用說(shuō)明：  
1.開(kāi)封后，可根據(jù)需要分裝成小管，建議每管分裝10μl，-20℃貯存，每次取一管使用。  
2.本產(chǎn)品已含有了上樣緩沖液，使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳，上樣量5-10μl。  
3.建議分離膠濃度為10-12%。  
注意事項(xiàng)：  
上樣前，蛋白樣品65℃預(yù)熱是必需的，否則電泳后一些蛋白會(huì)沉積在分離膠的上沿，出現(xiàn)一條蛋白雜帶。  
儲(chǔ)存條件：  
避免反復(fù)凍融，建議分裝后于-20℃保存。  
中文名稱：非預(yù)染中分子量蛋白Marker(43-200kDa)  
英文名字：Middle Molecular Weight Protein Marker  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
本產(chǎn)品包含5種蛋白質(zhì)混合物，分子量范圍為43kD-200kD，條帶分別為：43，66.2，97.4，130，220。過(guò)SDS-PAGE電泳，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到分布均勻密度相近的5條帶?？梢杂脕?lái)判斷SDS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量。  
使用說(shuō)明：  
1.開(kāi)封后，可根據(jù)需要分裝成小管，建議每管分裝10μl，-20℃貯存，每次取一管使用。  
2.本產(chǎn)品已含有了上樣緩沖液，使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳，上樣量5-10μl。  
3.建議分離膠濃度為8%。  
注意事項(xiàng)：上樣前，蛋白樣品65℃預(yù)熱是必需的，否則電泳后一些蛋白會(huì)沉積在分離膠的上沿，出現(xiàn)一條蛋白雜帶。  
儲(chǔ)存條件：  
-20℃可保存至少六個(gè)月。避免反復(fù)凍融，建議分裝后于-20℃保存。  
中文名稱：非預(yù)染蛋白marKer  
英文名字：Unstained Protein Ladder(Middle RanGe)  
概述  
本產(chǎn)品為7種蛋白的混合(14.4~116kDa)，適用于SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis）和免疫印跡（Western blot）中蛋白含量的檢測(cè)。  
使用說(shuō)明  
上樣5ul: 0.75mm厚度迷你膠板  
上樣10ul:1.5mm厚度迷你膠板; 0.75mm厚度大膠板  
上樣20ul:1.5mm厚度大膠板  
技術(shù)規(guī)格  
條帶為4.4, 18.4, 25, 35, 45, 66.2, 116 kDa.  
中文名稱：Western blot蛋白Marker  
英文名字：Western blot Protein Ladder  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：  
Western Blot Marker是專門(mén)為Western Blot試驗(yàn)設(shè)計(jì)的分子量標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)的Western Blot試驗(yàn)需要使用預(yù)染蛋白Marker來(lái)跟蹤檢測(cè)陽(yáng)性抗原信號(hào)和轉(zhuǎn)膜效率。但預(yù)染蛋白Marker用在Western Blot試驗(yàn)中有三大缺點(diǎn)：（1）預(yù)染蛋白Marker無(wú)法在膠片上曝光，曝光信號(hào)需要根據(jù)膜上的預(yù)染蛋白Marker來(lái)判斷，此后續(xù)的圖片需要拼接才能兩者合而為一；（2）預(yù)染蛋白Marker都過(guò)化學(xué)修飾，過(guò)化學(xué)修飾的蛋白在SDS-PAGE電泳過(guò)程中遷移率發(fā)生改變，分子量信息不再準(zhǔn)確，往往導(dǎo)致Western Blot結(jié)果判斷出現(xiàn)較大偏差；（3）預(yù)染蛋白Marker無(wú)法檢測(cè)作為雜交過(guò)程的陽(yáng)性對(duì)照。Western Blot Marker由6種不同分子量的蛋白組成（20、40、60、70、80、120 KDa），其中70KDa條帶為藍(lán)色預(yù)染marker，其它五個(gè)條帶都可與人、小鼠、大鼠、山羊、綿羊、兔的IgG恒定區(qū)結(jié)合。Western Blot Marker可以直接結(jié)合二抗，或通過(guò)結(jié)合一抗間接結(jié)合二抗，此蛋白Marker就能與抗原在同一張膠片上曝出信號(hào)，陽(yáng)性信號(hào)可以直接通過(guò)Western Blot Marker的位置來(lái)判斷。Western Blot Marker不過(guò)任何化學(xué)修飾，分子量精確。  
中文名稱：GE高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)(GE17-0445-01)  
英文名字：GE HMW Natie Marker Kit  
描述及應(yīng)用：  
通過(guò)和標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)比，用PAGE膠檢測(cè)未知樣品蛋白含量。  
特點(diǎn)：  
根據(jù)遷移距離，可得清晰的條帶。  
通過(guò)考馬斯亮藍(lán)法或銀染法，可得到肉眼可見(jiàn)的蛋白染色條帶。  
主要成分：  
豬甲狀腺球蛋白: 76 μg, 669000 (Mr)  
馬脾臟鐵蛋白: 50 μg, 440000 (Mr)  
牛過(guò)氧化氫酶: 36 μg, 232000 (Mr)  
牛乳糖脫氫酶: 48 μg, 140000 (Mr)