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細胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1022  
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣  
生長特性  懸浮生長  
特征特性   該細胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS  
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次  
傳代情況  P3  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測  熒光法（-）　  
STR   -  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1022實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后，將動物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細胞均勻分散，在酒精燈火焰上來回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項：
1.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。SDS-PAGE凝膠電泳或轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶，其中25kD為綠色條帶，75kD為紅色條帶，其余8條是藍色條帶。  
產(chǎn)品特點：  
三色預(yù)染，顏色鮮亮，條帶整齊，便于觀察。  
穩(wěn)定性能突出，檢測4℃放置兩年無明顯降解。  
用量少，節(jié)約成本，僅5ul即可*呈現(xiàn)（1.5mm，10孔梳）。  
廣譜多帶，一支即可滿足多種實驗需求。  
注意事項：   
1.本產(chǎn)品含有較高濃度甘油，常規(guī)-20℃保存為液體狀態(tài)，可直接使用。若冰箱溫度不穩(wěn)，導(dǎo)致結(jié)冰，可適當(dāng)分裝后置于4℃保存，至少穩(wěn)定6個月。  
2.Marker分離效果與PAGE膠濃度相關(guān)，若分離膠濃度低于15%，25kD以下條帶不易分離，但不影響綠色（25KD）及以上條帶。如果目的條帶小于25KD，建議分離膠濃度大于或等于15%。  
3.轉(zhuǎn)膜效果與轉(zhuǎn)膜時間有關(guān)，需根據(jù)客戶目的條帶大小而定，如果轉(zhuǎn)膜后較大分子量條帶有部分未轉(zhuǎn)膜成功，屬于正?，F(xiàn)象。  
儲存條件：  
-20℃保存，有效期至少2年。  
中文名稱：預(yù)染彩虹蛋白marker (40-300 KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡介：  
本產(chǎn)品為三色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)，由分子量從40 kDa到300 kDa的8種高純度預(yù)染蛋白質(zhì)組成，其中70 kDa和300 kDa條帶為橙色，50 kDa條帶為綠色，其余條帶為藍色。  
本產(chǎn)品適合應(yīng)用于SDS-PAGE時觀察蛋白電泳情況， Western Blot時判斷蛋白轉(zhuǎn)移效率，以及SDS-PAGE和Western Blot時的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)。  
本產(chǎn)品以凝膠上樣緩沖液形式提供，緩沖液成分為：62.5mM Tris-H3PO4 (pH 7.5)，1mM EDTA，2%(w/) SDS，10mM DTT，1mM NaN3以及33%(/) glycerol，直接使用，無需加熱。上樣量根據(jù)凝膠厚度和大小而定，請參考說明書中的使用方法。  
產(chǎn)品特點：  
1. 八條帶組成的蛋白Marker分子量范圍廣泛；  
2. 與蛋白印跡膜具有親和性，可以監(jiān)測Western blot實驗中的轉(zhuǎn)膜效率；  
3. 50 kDa綠色條帶、70 kDa和300 kDa橙色條帶組合便于實時觀察電泳進程、判斷蛋白分子量。  
中文名稱：預(yù)染蛋白Marker(BIO-RAD)  
英文名字：Precision Plus Protein Dual Color Standards alue Pack  
分子式：分子量： 預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在水中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在生理鹽水中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在PBS緩沖液中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在DMSO、乙醇等有機溶劑中的溶解性，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在細胞實驗方面的應(yīng)用，預(yù)染蛋白MARKER(BIO-RAD)在大鼠等動物實驗方面的應(yīng)用。  
中文名稱：預(yù)染超低分子量蛋白Marker(3.3kD-31.0kDDa)  
英文名字：Ultra LowMolecular Weight Protein Marker  
產(chǎn)品簡介：  
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉，每種預(yù)染蛋白含量約為40mg，配有一支1×上樣緩沖液。  
使用說明:  
1.開封后，溶于200ml 1×上樣緩沖液，可根據(jù)需要進行小量分裝，每管10ml，-20℃貯存，每次取一管使用，避免反復(fù)凍融。  
2.使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。  
儲存條件：  
-20℃保存，有效期為一年。避免反復(fù)凍融，建議分裝凍存。  
中文名稱：預(yù)染彩虹蛋白marker (11-245KD)  
英文名字：Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡介：  
本產(chǎn)品包含12種彩色預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白，分子量范圍為11kD-245kD，每種蛋白含量約為0.2-0.4mg/ml。預(yù)染marker可以用于直接觀察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。SDS-PAGE凝膠電泳或轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的10條彩色蛋白條帶，其中25kD為綠色條帶，75kD為紅色條帶，其余10條是藍色條帶。  
產(chǎn)品特點：  
三色預(yù)染，顏色鮮亮，條帶整齊，便于觀察。  
穩(wěn)定性能突出，檢測4℃放置兩年無明顯降解。  
用量少，節(jié)約成本，僅5ul即可*呈現(xiàn)（1.5mm，10孔梳）。  
廣譜多帶，一支即可滿足多種實驗需求。  
注意事項：  
1.本產(chǎn)品含有較高濃度甘油，常規(guī)-20℃保存為液體狀態(tài)，可直接使用。若冰箱溫度不穩(wěn)，導(dǎo)致結(jié)冰，可適當(dāng)分裝后置于4℃保存，至少穩(wěn)定6個月。  
2.Marker分離效果與PAGE膠濃度相關(guān)，若分離膠濃度低于15%，25kD以下條帶不易分離，但不影響綠色（25KD）及以上條帶。如果目的條帶小于25KD，建議分離膠濃度大于或等于15%。  
3.轉(zhuǎn)膜效果與轉(zhuǎn)膜時間有關(guān)，需根據(jù)客戶目的條帶大小而定，如果轉(zhuǎn)膜后較大分子量條帶有部分未轉(zhuǎn)膜成功，屬于正?，F(xiàn)象。  
儲存條件：  
-20℃保存，有效期至少2年。