上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2022-03-30 10:41:01瀏覽次數(shù):310
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操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
我司提供免費代測服務,凡購買我司試劑盒的用戶,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度,雙方協(xié)定實驗周期,保質(zhì)保量完成委托實驗,并將實驗結(jié)果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。
從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導。
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Kim-1腎損傷分子1酶聯(lián)免疫試劑盒 | Kim-1 ELISA Kit | CS-2542E |
實驗室注意事項:
1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。
2、務必使用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。
3、取完一種試劑后,應將工具洗凈、擦干后,方可取用另一種試劑。
4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。
5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
實驗標準品圖:
40 ng/L,5號標準品,150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
20 ng/L,4號標準品,150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 ng/L,3號標準品,150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
5 ng/L,2號標準品,150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5 ng/L,1號標準品,150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照國家標準進行,已獲得國家承認的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
人葡萄糖變位Bacillus cereus
人亮氨酰肽Bacillus cereus胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒
人鏈激Bacillus cereus胃粘液素檢測試劑盒
人核糖核酸Bacillus cereus烏頭酸2檢測試劑盒
人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物Bacillus cereus無翅型MMTV整合位點家族成員4檢測試劑盒
人芳基酯ABacillus cereus五聚素3檢測試劑盒
人對氧磷Bacillus cereus戊肝抗原檢測試劑盒
人酮酸激Bacillus cereus硒蛋白檢測試劑盒
Kim-1腎損傷分子1酶聯(lián)免疫試劑盒3,4-二氧乙 97%Anti-MSK1/FITC 熒光素標記有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體IgG豬G補綴FHA域血管生成因子1(AGGF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,4-二氧肉桂 99%Anti-Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC 熒光素標記化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體IgG豬S轉(zhuǎn)移ω1(GSTω1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
4-氧肉桂 99%Anti-Phospho-MSK1 (Ser212)/FITC 熒光素標記化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體IgG豬免疫球蛋白G Fc段結(jié)合蛋白(FcγBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
4-肉桂 99%Anti-Phospho-MSK1 (Ser376) /FITC 熒光素標記化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體IgG豬VII型膠原(COL7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,4,5-氧肉桂 99%Anti-Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC 熒光素標記化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體IgG豬血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
98%Anti-MSLN /FITC 熒光素標記間皮素抗體IgG豬胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鵝 99%Anti-MST1/FITC 熒光素標記蛋白激MST抗體IgG豬腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
山俞 technical, ≥85%Anti-Phospho-Mst1 (Thr183)/Mst2 (Thr180) /FITC 熒光素標記化蛋白激MST抗體IgG豬T特異性鳥苷三(Tgtp)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
山崳 分析標準品Anti-MT/FITC 熒光素標記金屬硫蛋白抗體IgG豬上皮膜抗原(EMA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
芥 80%Anti-MTA1/FITC 熒光素標記腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體IgG豬結(jié)蛋白(Des)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
紅 85%Anti-MTHFR/FITC 熒光素標記亞四氫葉還原抗體IgG豬脫氫C(LDHC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
紅 96%Anti-MTL/FITC 熒光素標記胃動素抗體IgG豬非受體酪氨激2(TNK2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
莧菜紅 分析標準品Anti-MTLR/FITC 熒光素標記抗胃動素受體抗體IgG豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
藏花橙G 70%Anti-MTNR1A/MTR-1A /FITC 熒光素標記褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體IgG豬表皮脂肪結(jié)合蛋白5(FABP5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
胭脂紅 97%,用于生物學染色Anti-MTNR1B/MTNR-1B/FITC 熒光素標記褪黑素受體1B抗體IgG豬胃內(nèi)因子(GIF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒