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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供穩(wěn)定表達GFP的shRNA靶向干擾YB-1基因人肺腺癌A549細胞株；A549/YBX1-homo-746
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細胞名稱 穩(wěn)定表達GFP的shRNA靶向干擾YB-1基因人肺腺癌A549細胞株；A549/YBX1-homo-746
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
746
使用權(quán)限 未定培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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小鼠催產(chǎn)素(OT)elisa試劑盒 Mouse oxytocin, OT Elisa Kit 96T/48T
7 Mouse macrophage inflammatory protein 3β, MIP-3β Elisa Kit  96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒 Mouse cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit 96T/48T
小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒 Mouse 5-Nucleotidase, 5-NT Elisa Kit  96T/48T
小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)elisa試劑盒 Mouse Nerve growth factor, NGF Elisa Kit  96T/48T
小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)elisa試劑盒 Mouse Neurotrophin 3, NT-3 Elisa Kit  96T/48T
小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)elisa試劑盒 Mouse Neurotrophin 4, NT-4 Elisa Kit 96T/48T
小鼠骨保護素(OPG)elisa試劑盒 Mouse Osteoprotegerin, OPG Elisa Kit 96T/48T
小鼠B因子(BF)elisa試劑盒 Mouse factor B, BF Elisa Kit  96T/48T
小鼠抑瘤素M(OSM)elisa試劑盒 Mouse Oncostatin-M, OSM Elisa Kit  96T/48T
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小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒 Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α, PDGFsR-α Elisa Kit  96T/48T
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒 Mouse Plaet-Derived Growth Factor AB, PDGF-AB Elisa Kit  96T/48T
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒 Mouse P-Selectin Elisa Kit  96T/48T
小鼠L苯解氨酶(PAL)elisa試劑盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase, PAL Elisa Kit  96T/48T
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa試劑盒 Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand, sCD30L Elisa Kit  96T/48T
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)elisa試劑盒 Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor, SCF/MGF Elisa Kit  96T/48T
小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa試劑盒 Mouse Stromal cell derived factor 1β, SDF-1β Elisa Kit  96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)elisa試劑盒 Mouse Transforming Growth factor β1, TGF-β1 Elisa Kit  96T/48T
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒 Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ, TNFsR-Ⅰ Elisa Kit  96T/48T
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒 Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ, TNFsR-Ⅱ Elisa Kit  96T/48T
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒 Mouse Tumor necrosis factor α, TNF-α Elisa Kit  96T/48T
小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)elisa試劑盒 Mouse Tumor necrosis factor β, TNF-β Elisa Kit  96T/48T
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅳ, Col Ⅳ Elisa Kit 96T/48T
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒 Mouse Hexokinase, HK Elisa Kit 96T/48T
小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) elisa試劑盒 Mouse pyruvate dehydrogenase-E1, PDH E1 Elisa Kit 96T/48T
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)elisa試劑盒 Mouse glycogen synthase kinase, GSK Elisa Kit 96T/48T
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)elisa試劑盒 Mouse CXC-chemokine ligand 16, CXCL16 Elisa Kit 96T/48T
小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)elisa試劑盒 Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine, u-T3 Elisa Kit 96T/48T
小鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒 Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2, Bcl-2 Elisa Kit 96T/48T
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)elisa試劑盒 Mouse CXC-chemokine receptor 3, CXCR3 Elisa Kit 96T/48T
小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)elisa試劑盒 Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor, TGSF Elisa Kit 96T/48T
小鼠羥(Hyp)elisa試劑盒 Mouse hydroxyproline, Hyp Elisa Kit 96T/48T
小鼠骨保護素配體(OPGL)elisa試劑盒 Mouse Osteoprotegerin Ligand, OPGL Elisa Kit 96T/48T
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)elisa試劑盒 Mouse Lactoferrin, LTF/LF Elisa Kit 96T/48T
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒 Mouse anti-Endomysial Antibody IgA, EMA IgA Elisa Kit 96T/48T