上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:17:46瀏覽次數(shù):293
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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18
的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 無
傳代情況 1:3傳代,3-4天傳1次
凍存條件 C5
支原體檢測 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR 陰性
同工酶
染色體 未做培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor 1, IGF-1 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素10(IL-10)elisa試劑盒 Mouse interleukin 10, IL-10 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素11(IL-11)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 11, IL-11 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素15(IL-15)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 15, IL-15 Elisa Kit 96T/48T
小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒 Mouse 17-Hydroxycorticosteroids, 17-OHCS Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素2(IL-2)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 2, IL-2 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素4(IL-4)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 4, IL-4 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素6(IL-6)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 6, IL-6 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素9(IL-9)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 9, IL-9 Elisa Kit 96T/48T
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)elisa試劑盒 Mouse Leptin receptor, LR/Ob-R Elisa Kit 96T/48T
小鼠瘦素(LEP)elisa試劑盒 Mouse Leptin, LEP Elisa Kit 96T/48T
小鼠白血病抑制因子(LIF)elisa試劑盒 Mouse Leukemia inhibitory factor, LIF Elisa Kit 96T/48T
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1β, MIP-1β Elisa Kit 96T/48T
小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 3α, MIP-3α Elisa Kit 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)elisa試劑盒 Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A, MMP-2 Elisa Kit 96T/48T
小鼠腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)elisa試劑盒 Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH Elisa Kit 96T/48T
鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗 Mouse anti-human D-Pantothenic Acid mAb 0.1ml/0.2ml
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)elisa試劑盒 Mouse mucin-5 subtype B, MUC5B Elisa Kit 96T/48T
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)elisa試劑盒 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide, PACAP Elisa Kit 96T/48T
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)elisa試劑盒 Mouse single stranded DNA Antibody, ssDNA Elisa Kit 96T/48T
小鼠磷脂酰(PS)elisa試劑盒 Mouse phosphatidylserine, PS Elisa Kit 96T/48T
小鼠磷酸甘油酯(PC/CPG)elisa試劑盒 Mouse choline phosphoglyceride, PC/CPG Elisa Kit 96T/48T
小鼠β-防御素(β-DF)elisa試劑盒 Mouse β-Defensins, β-DF Elisa Kit 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒 Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen, ⅠCTP Elisa Kit 96T/48T
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)elisa試劑盒 Mouse neurofilament protein, NF Elisa Kit 96T/48T
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)elisa試劑盒 Mouse small nuclear ribonucleoprotein, snRNP/Sm Elisa Kit 96T/48T
小鼠/蛋白磷酸酶(STK)elisa試劑盒 Mouse serine/threonine protein kinase, STK Elisa Kit 96T/48T
小鼠IgG elisa試劑盒 Mouse IgG Elisa Kit 96T/48T
小鼠IgM elisa試劑盒 Mouse IgM Elisa Kit 96T/48T
小鼠乳酸脫氫酶(LDH)elisa試劑盒 Mouse Lactate Dehydrogenase, LDH Elisa Kit 96T/48T
小鼠抗紅細胞抗體(RBC)elisa試劑盒 Mouse anti-red cell antibody Elisa Kit 96T/48T