上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-09 09:21:28瀏覽次數(shù):393
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細(xì)胞名稱 人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞株;IHC-ST1
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 無
傳代情況 1:3傳代,3-4天傳1次
凍存條件 C5
支原體檢測(cè) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR 陰性
同工酶
染色體 未做人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞株;IHC-ST1
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人類粘蛋白2(ORM2)elisa試劑盒 human orosomucoid 2, ORM2 Elisa Kit 96T/48T
人MAX二聚化蛋白1(mxd1)elisa試劑盒 human MAX dimerization protein 1, mxd1 Elisa Kit 96T/48T
人水閘蛋白14(CLDN14)elisa試劑盒 human claudin 14, CLDN14 Elisa Kit 96T/48T
人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)elisa試劑盒 human lectin-galactose binding-soluble 3, Lgals3 Elisa Kit 96T/48T
人主要穹窿蛋白(MVP)elisa試劑盒 human major vault protein, MVP Elisa Kit 96T/48T
人泛素蛋白D(UBD)elisa試劑盒 human ubiquitin D, UBD Elisa Kit 96T/48T
人toll樣受體2(TLR2)elisa試劑盒 human toll-like receptor 2, TLR2 Elisa Kit 96T/48T
人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)elisa試劑盒 human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog, HFE2 LISA Kit 96T/48T
人卷曲蛋白8(FZD8)elisa試劑盒 human frizzled homolog 8, FZD8 Elisa Kit 96T/48T
人蝸牛同源物2(SNAI2)elisa試劑盒 human snail homolog 2, SNAI2 Elisa Kit 96T/48T
人高爾基蛋白73(GP-73)elisa試劑盒 Human golgi protein 73, GP-73 Elisa Kit 96T/48T
人TU3A蛋白(TU3A)elisa試劑盒 Human TU3A Protein Elisa Kit 96T/48T
人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)elisa試劑盒 Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide, ETFB Elisa Kit 96T/48T
人皮膚蛋白(DPT)elisa試劑盒 Human dermato-pontin, DPT Elisa Kit 96T/48T
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)elisa試劑盒 Human soluble protein 185, sp185/HER-2 Elisa Kit 96T/48T
人降解加速因子(DAF)elisa試劑盒 Human decay-accelerating factor, DAF Elisa Kit 96T/48T
人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)elisa試劑盒 Human Linker for activation of T cell, LAT Elisa Kit 96T/48T
人SH2攜蛋白(SHC/SLP-76)elisa試劑盒 Human SH2-containing protein, SHC/SLP-76 Elisa Kit 96T/48T
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)elisa試劑盒 Human B-Cell Linker Protein, BLNK Elisa Kit 96T/48T
人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)elisa試劑盒 Human urease related protein C, UreC Elisa Kit 96T/48T
人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)elisa試劑盒 Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1, APAF1 Elisa Kit 96T/48T
人錨蛋白B(Ank-B)elisa試劑盒 Human ankyrin B, Ank-B Elisa Kit 96T/48T
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)elisa試劑盒 Human latent membrane protein-1, LMP-1 Elisa Kit 96T/48T
人重組激活基因2(RAG-2)elisa試劑盒 Human recombination activating gene 2, RAG-2 Elisa Kit 96T/48T
人重組激活基因1(RAG-1)elisa試劑盒 Human recombination activating gene 1, RAG-1 Elisa Kit 96T/48T
人NOD樣受體(NLR)elisa試劑盒 Human NOD-like receptor9, NLR Elisa Kit 96T/48T
人誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)elisa試劑盒 Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor, RLR-9 Elisa Kit 96T/48T
人清道夫受體B(SRB/CD36)elisa試劑盒 Human scavenger receptor B, SRB Elisa Kit 96T/48T
人殺菌肽B(CecB)elisa試劑盒 Human cecropin B, CecB Elisa Kit 96T/48T
人抗菌肽(Att)elisa試劑盒 Human Attacin, Att Elisa Kit 96T/48T
人顆粒溶素(GNLY)elisa試劑盒 Human granulysin, GNLY Elisa Kit 96T/48T
人富組蛋白(HTN5)elisa試劑盒 Human histatin 5, HTN5 Elisa Kit 96T/48T
樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)elisa試劑盒 Human Ig-like transcripts Receptor, ILTsR Elisa Kit 96T/48T