上海莼試生物技術(shù)有限公司
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BT-325
的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱 人腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BT-325
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系于1985年由北京神經(jīng)外科研究所建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;D8S1179:13,15;D21S11:29,32.2;D7S820:12,13;CSF1PO:11, 13;D3S1358:15, 16;TH01:8, 9;D13S317:13;D16S539:9,11;D2S1338:24;D19S433:14,15.2;vWA:14;THOX:8,11;D18S51:14,21;D5S818:10;FGA:19,23。
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。
2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人B細(xì)胞受體(BCR)elisa試劑盒 Human B cell receptor, BCR Elisa Kit 96T/48T
人表免疫球蛋白M(mIgM)elisa試劑盒 Human membrane IgM, mIgM Elisa Kit 96T/48T
人表免疫球蛋白D(mIgD)elisa試劑盒 Human membrane IgD, mIgD Elisa Kit 96T/48T
人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)elisa試劑盒 Human killer cell immnoglobulin-like receptor, KIR Elisa Kit 96T/48T
人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)elisa試劑盒 Human killer cell lectin-like receptor, KLR Elisa Kit 96T/48T
人活化蛋白C(APC) elisa試劑盒 Human activated protein C, APC Elisa Kit 96T/48T
人蛋白C(Protein C)elisa試劑盒 Human Protein C Elisa Kit 96T/48T
人血小板因子3(PF-3)elisa試劑盒 Human plaet factor 3, PF3 Elisa Kit 96T/48T
人原片段F1+2(F1+2)ELISA Human prothrombin fragment 1+2, F1+2 Elisa Kit 96T/48T
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)elisa試劑盒 Human Mannma binding protein/mannan binding lectin, MBP/MBL Elisa Kit 96T/48T
人膜攻擊復(fù)合物(MAC)elisa試劑盒 Human membrane attack complex, MAC Elisa Kit 96T/48T
人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒 Human EuglobulinLysis, EL Elisa Kit 96T/48T
人游離血紅蛋白(f-Hb)elisa試劑盒 Human free haemoglobin, f-Hb Elisa Kit 96T/48T
人1(PRM1)elisa試劑盒 Human Protamine 1, PRM1 Elisa Kit 96T/48T
人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)elisa試劑盒 Human carboxyhemoglobin, HbCO Elisa Kit 96T/48T
人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒 Human plaet-associated immunoglobulins, PAIg Elisa Kit 96T/48T
人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)elisa試劑盒 Human plaet-associated Complement 3, PAC3 Elisa Kit 96T/48T
人血栓素A2(TX-A2)elisa試劑盒 Human Thromboxane A2, TX-A2 Elisa Kit 96T/48T
人血紅蛋白H(HbH)elisa試劑盒 Human Hemoglobin H, HbH Elisa Kit 96T/48T
人血紅蛋白C(HbC)elisa試劑盒 Human Hemoglobin C, HbC Elisa Kit 96T/48T
人纖維蛋白(Fibrin)elisa試劑盒 Human Fibrin Elisa Kit 96T/48T
人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)elisa試劑盒 Human fibrinopeptide B, FPB Elisa Kit 96T/48T
人纖溶酶原激活劑(PLGA)elisa試劑盒 Human plasminogen activator, PLGA Elisa Kit 96T/48T
人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)elisa試劑盒 Human Surface Membrane Immunoglobulin, SmIg Elisa Kit 96T/48T
人前白蛋白(PA)elisa試劑盒 Human prealbumin, PA Elisa Kit 96T/48T
人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)elisa試劑盒 Human heparin sulphate protoglycans, HSPG Elisa Kit 96T/48T
人冷球蛋白(CG)elisa試劑盒 Human Cryoglobulin, CG Elisa Kit 96T/48T
人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa試劑盒 Human erythrocyte membrane protein, EMP Elisa Kit 96T/48T
人高鐵血紅蛋白(MHB)elisa試劑盒 Human Methemoglobin, MHB Elisa Kit 96T/48T
人低分子肝素(LMWH)elisa試劑盒 Human low molecular weight heparin, LMWH Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)elisa試劑盒 Human Complement 3 split product, C3SP Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)elisa試劑盒 Human Complement fragment 3b rccptor, C3bR Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)elisa試劑盒 Human Complement 1 inhibitor autoantibody, C1INH Elisa Kit 96T/48T
人B因子(BF)elisa試劑盒 Human factor B, BF Elisa Kit 96T/48T
人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)elisa試劑盒 Human leukocyte antigen G, HLA-G Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片斷3b(C3b)elisa試劑盒 Human Complement fragment 3b, C3b Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片斷4b(C4b)elisa試劑盒 Human Complement fragment 4b, C4b Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片斷5b(C5b)elisa試劑盒 Human Complement fragment 5b, C5b Elisa Kit 96T/48T
重鏈(IgH)elisa試劑盒 Human immunoglobulin heavy chain, IgH Elisa Kit 96T/48T
重鏈可變區(qū)(IgHV)elisa試劑盒 Human immunoglobulin heavy chain variable region, IgHV Elisa Kit 96T/48T