上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:27:33瀏覽次數(shù):424
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系是1972年由Giard DJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的,源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰途徑合成富含不飽和脂肪酸的;角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN9
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:13;D21S11:29;D2S1338:24;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14;
同工酶
染色體 62-66
人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
小鼠白介素13(IL-13)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 13, IL-13 Elisa Kit 96T/48T
小鼠白介素18(IL-18)elisa試劑盒 Mouse Interleukin 18, IL-18 Elisa Kit 96T/48T
人(TM)elisa試劑盒 Human Thrombin, TM Elisa Kit 96T/48T
人Ⅶ(FⅦ)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅶ, FⅦ Elisa Kit 96T/48T
人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)elisa試劑盒 Human soluble human leucocyte antigen G1, sHLA-G Elisa Kit 96T/48T
人原(PT)elisa試劑盒 Human Prothrombin, PT Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體因子D(CFD)elisa試劑盒 Human complement factor D, CFD Elisa Kit 96T/48T
人血漿纖維連接蛋白(pFN)elisa試劑盒 Human Plasma fibronectin, pFN Elisa Kit 96T/48T
人細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn)elisa試劑盒 Human cellular fibronectin, cFn Elisa Kit 96T/48T
人總蛋白S(TPS)elisa試劑盒 Human Total protein S, TPS Elisa Kit 96T/48T
人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)elisa試劑盒 human serum deprivation response, SDPR Elisa Kit 96T/48T
人中性粒細(xì)胞防御素1-3(HNP1-3)elisa試劑盒 Human neutrophil peptide 1-3, HNP1-3 Elisa Kit 96T/48T
人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)elisa試劑盒 Human eosinophil cationic protein, ECP Elisa Kit 96T/48T
人血漿抗凝蛋白S(PS) elisa試劑盒 Human plasma anticoagulant protein S, PS Elisa Kit 96T/48T
人血漿抗凝蛋白C(PC) elisa試劑盒 Human plasma anticoagulant protein C, PC Elisa Kit 96T/48T
G Fc片段(Fcγ)elisa試劑盒 Human Fc region of immunoglobulin G, Fcγ Elisa Kit 96T/48T
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)elisa試劑盒 Human cyclophilin B, CyPB Elisa Kit 96T/48T
人C4結(jié)合蛋白(C4BP)elisa試劑盒 Human C4 binding protein, C4BP Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片段3c(C3c)elisa試劑盒 Human Complement fragment 3c, C3c Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體7(C7)elisa試劑盒 Human Complement fragment 3c, C3c Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體7(C7)elisa試劑盒 Human Complement 7, C7 Elisa Kit 96T/48T
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-42, Aβ1-42 Elisa Kit 96T 96T/48T
人chemerin elisa試劑盒 Human chemerin Elisa Kit 96T/48T
人Ⅻ(FⅫ)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅻ, FⅫ Elisa Kit 96T/48T
人ⅩⅢ(FⅩⅢ)elisa試劑盒 Human coagulation factor ⅩⅢ, FⅩⅢ Elisa Kit 96T/48T
人Ⅲ(FⅢ)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅲ, FⅢ Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體1q(C1q)elisa試劑盒 Human Complement 1q, C1q Elisa Kit 96T/48T
人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)elisa試劑盒 Human plaet membrane glycoprotein Ⅳ, GP-Ⅳ Elisa Kit 96T/48T
人α1(Thymosin α1)elisa試劑盒 Human Thymosin α1 Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)elisa試劑盒 Human complement control protein, CCP Elisa Kit 96T/48T
人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)elisa試劑盒 Human plaet basic protein, PBP Elisa Kit 96T/48T
人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)elisa試劑盒 Human leukocyte antigen C, HLA-C Elisa Kit 96T/48T
人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)elisa試劑盒 Human leukocyte antigen E, HLA-E Elisa Kit 96T/48T
人類白細(xì)胞抗原A(HLA-A)elisa試劑盒 Human leukocyte antigen A, HLA-A Elisa Kit 96T/48T
人血清淀粉樣蛋白P(SAP)elisa試劑盒 Human Serum amyloid P, SAP Elisa Kit 96T/48T
人甘露糖凝集素受體(MBLR)elisa試劑盒 Human Mannma binding lectin receptor, MBLR Elisa Kit 96T/48T
人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)elisa試劑盒 Human plasmin/fibrinolysin, PL/Fbn Elisa Kit 96T/48T