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上海莼試生物技術有限公司
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更新時間：2017-06-09 09:32:29瀏覽次數(shù)：359
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公司是*的ATCC細胞供應商，提供人神經(jīng)母細胞瘤；SH-SY5Y的報價，咨詢，稱技術服務，咨詢選購。
細胞名稱 人神經(jīng)母細胞瘤；SH-SY5Y
形態(tài)特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁懸浮混合生長
特征特性 該細胞系來源于1970年建立的一神經(jīng)母細胞瘤患者的轉(zhuǎn)移骨瘤灶細胞SK-N-SH經(jīng)三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 SH-SY5Y細胞的生長密度可高達1X106細胞/cm2，生長成懸浮和貼壁混合生長，有的聚集成細胞叢
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN8
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO:11；D13S317:11；D16S539:8,13；D18S51:13,16；D19S433:13,14；D21S11:31,31.2；D2S1338:17,19；D3S1358:15,16；D5S818:7,12；D7S820:7,10；D8S1179:10,15；FGA:23.2,24；TH01:7,10；THOX:8,11；vWA:14,18；
同工酶 無
染色體 46-48
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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人軸突生長誘向因子1(Ntn1)elisa試劑盒 Human Netrin-1, Ntn1 Elisa Kit 96T/48T
人硫酸腦苷酯(SFT)elisa試劑盒 Human sulfatide, SFT Elisa Kit 96T/48T
人再生基因蛋白IV(REG-4)elisa試劑盒 Human regenerating gene Ⅳ, REG-4 Elisa Kit 96T/48T
人多功能蛋白聚糖(VS)elisa試劑盒 human versican/PG-M/PG-350, VS Elisa Kit 96T/48T
人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)elisa試劑盒 human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon, Nfkbie 96T/48T
人ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa試劑盒 human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4, ADAMTS4 Elisa Kit 96T/48T
人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 elisa試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene Elisa Kit 96T/48T
人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)elisa試劑盒 human progestin and adipoQ receptor family member Ⅶ, PAQR7 Elisa Kit 96T/48T
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)elisa試劑盒 human collectin sub-family member 11, COLEC11 Elisa Kit 96T/48T
人蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G(Serpina3g)elisa試劑盒 human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G, Serpina3g Elisa Kit 96T/48T
人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因 elisa試劑盒 human similar to RIKEN cDNA A630077B13 gene Elisa Kit 96T/48T
人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 elisa試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene Elisa Kit 96T/48T
人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 elisa試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene Elisa Kit 96T/48T
人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 elisa試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene Elisa Kit 96T/48T
人ras同源物基因家族成員b(RHOB)elisa試劑盒 human ras homolog gene family, memmber B, RHOB Elisa Kit 96T/48T
人假定蛋白LOC677340 elisa試劑盒 human hypothetical protein LOC677340 Elisa Kit 96T/48T
人假定蛋白LOC433328 elisa試劑盒 human hypothetical protein LOC433328 Elisa Kit 96T/48T
人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)elisa試劑盒 human myeloid differentiation primary response gene 88, MYD88 Elisa Kit 96T/48T
人干擾素活化基因205(Ifi205)elisa試劑盒 human interferon activated gene 205, Ifi205 Elisa Kit 96T/48T
人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)elisa試劑盒 human Histocompatibility 2-K1-K region, H2-K1 Elisa Kit 96T/48T
人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)elisa試劑盒 human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4, LILRB4 Elisa Kit 96T/48T
人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)elisa試劑盒 human C-type lectin domain family 4 member e, CLEC4E Elisa Kit 96T/48T
人假定蛋白LOC677168 elisa試劑盒 human Hypothetical protein LOC677168 Elisa Kit 96T/48T
人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)elisa試劑盒 human lymphocyte antigen 6 complex locus A, Ly6a Elisa Kit 96T/48T
人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)elisa試劑盒 human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1, EAR1 Elisa Kit 96T/48T
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒 human mixed lineage kinase domain-like, MLKL Elisa Kit 96T/48T
