上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:38:06瀏覽次數(shù):328
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供小鼠胚胎成骨細胞前體細胞;MC3T3-E1
的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞;MC3T3-E1
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞有多個亞克隆,可以作為體外研究成骨細胞分化的良好模型,尤其是ECM信號通路的作用。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:6~1:8傳代;2~3天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 60~70培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人彈性蛋白酶(Elastase)elisa試劑盒 Human Elastase Elisa Kit 96T/48T
人白細胞彈性蛋白酶(HLE)elisa試劑盒 Human leukocyte exastase, HLE Elisa Kit 96T/48T
人彈性蛋白酶(Elastase)elisa試劑盒 Human Elastase Elisa Kit 96T/48T
人α(AMS/AMY)elisa試劑盒 Human α-Amylase, AMS/AMY Elisa Kit 96T/48T
人堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒 Human alkaline phosphatase, ALP Elisa Kit 96T/48T
人天青殺素(AZU)elisa試劑盒 Human azurocidin, AZU Elisa Kit 96T/48T
人血管緊張肽酶A(ATA)elisa試劑盒 Human Angiotensinase A, ATA Elisa Kit 96T/48T
人胰(PAMY)elisa試劑盒 Human Pancreatic Amylase, PAMY Elisa Kit 96T/48T
人α烯醇化酶(αENOL)elisa試劑盒 Human α-enolase, αENOL Elisa Kit 96T/48T
人膠原酶II(Collagenase II)elisa試劑盒 Human Collagenase Type II Elisa Kit 96T/48T
人膠原酶I(Collagenase I)elisa試劑盒 Human Collagenase I Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒 Human phospho Protein Kinase C, P-PKC Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒 Human phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒 Human phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa Kit 96T/48T
人乙酰酯酶(AChE)elisa試劑盒 Human Acetylcholinesterase, AChE Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa試劑盒 Human glucose oxidase, GOD Elisa Kit 96T/48T
人羥化酶(TH)elisa試劑盒 Human tyrosine hydroxylase, TH Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺脫羧酶(DDC)elisa試劑盒 Human dopamine decarboxylase, DDC Elisa Kit 96T/48T
人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)elisa試劑盒 Human non-neuronal enolase, NNE Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺-β羥化酶(DBH)elisa試劑盒 Human dopamine-β-hydroxylase, DBH Elisa Kit 96T/48T
人乙?;?CHAc)elisa試劑盒 Human choline acetylase, CHAc Elisa Kit 96T/48T
人異檸檬酸脫氫酶(ICD)elisa試劑盒 Human isocitrate dehydrogenase, ICD Elisa Kit 96T/48T
人原Ⅱ(Try-Ⅱ)elisa試劑盒 Human Trypsinogen-2, Try-ⅡElisa Kit 96T/48T
人腺苷脫氨酶(ADA)elisa試劑盒 Human adenosine deaminase, ADA Elisa Kit 96T/48T
人透明質(zhì)酸酶(HAase)elisa試劑盒 Human Hyaluronidase, HAase Elisa Kit 96T/48T
人天氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)elisa試劑盒 Human Aspartate aminotransferase, AST Elisa Kit 96T/48T
人酸性磷酸酶(ACP)elisa試劑盒 Human Acid Phosphatase, ACP Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)elisa試劑盒 Human glucose-6-phosphate isomerase, GPI Elisa Kit 96T/48T
人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)elisa試劑盒 Human Phosphoglucomutase, PGM Elisa Kit 96T/48T
人亮氨酰氨基肽酶(LAP)elisa試劑盒 Human Leucine aminopepridase, LAP Elisa Kit 96T/48T
人鏈激酶(SK)elisa試劑盒 Human Streptokinase, SK Elisa Kit 96T/48T
人核糖核酸酶(RNASE)elisa試劑盒 Human Ribonuclease, RNASE Elisa Kit 96T/48T
人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)elisa試劑盒 Human lipid peroxlde, LPO Elisa Kit 96T/48T
人芳基硫酸酯酶A(ASA)elisa試劑盒 Human aryl sulfatase A, ASA Elisa Kit 96T/48T
人對氧磷酶(PON)elisa試劑盒 Human paraoxonase, PON Elisa Kit 96T/48T
人丙酮酸激酶(PK)elisa試劑盒 Human pyruvate kinase, PK Elisa Kit 96T/48T
人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)elisa試劑盒 Human galactose-6-sulphate sulphatase, Gal-6S Elisa Kit 96T/48T
人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)elisa試劑盒 Human iduronate sulfatase, IDS Elisa Kit 96T/48T
人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)elisa試劑盒 Human β-glucuronidase, βGD Elisa Kit 96T/48T
人β葡糖苷酶(β-glucosidase)elisa試劑盒 Human β-glucosidase Elisa Kit 96T/48T
人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)elisa試劑盒 Human β-lactamase Elisa Kit 96T/48T
人β甘露糖苷酶(β Manase)elisa試劑盒 Human α mannosidase, α Manase Elisa Kit 96T/48T
人β半乳糖苷酶(βGAL)elisa試劑盒 Human α-galactosidase, αGAL Elisa Kit 96T/48T
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa試劑盒 Human α-L-iduronidase, IDUA Elisa Kit 96T/48T
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa試劑盒 Human α-L-iduronidase, IDUA Elisa Kit 96T/48T
人α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa試劑盒 Human α2-Antiplasmin, α2-AP Elisa Kit 96T/48T
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa試劑盒 Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase, NAG Elisa Kit 96T/48T
人L苯解氨酶(PAL)elisa試劑盒 Human L-Phenylalanine ammonla-lyase, PAL Elisa Kit 96T/48T
人5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒 Human 5-Nucleotidase, 5-NT Elisa Kit 96T/48T
人1,3-βD葡葡糖苷酶