上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:43:15瀏覽次數(shù):279
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細(xì)胞名稱 小鼠紅白血病細(xì)胞;MEL
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 DMSO可誘導(dǎo)該細(xì)胞向紅系分化。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 35~44
使用權(quán)限 A類
小鼠紅白血病細(xì)胞;MEL
實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
LRP-6 Elisa Kit 96T/48T
人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)elisa試劑盒 Human very low density lipoprotein receptor, VLDLR Elisa Kit 96T/48T
人低密度脂蛋白受體(LDLR)elisa試劑盒 Human very low density lipoprotein receptor, VLDLR Elisa Kit 96T/48T
人高密度脂蛋白(HDL)elisa試劑盒 Human High density lipoprotein, HDL Elisa Kit 96T/48T
人αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)elisa試劑盒 Human α-glutathione S-transferases, α-GST Elisa Kit 96T/48T
人同型半(Hcy)elisa試劑盒 Human Homocysteic acid, Hcy Elisa Kit 96T/48T
人游離脂肪酸(FFA)elisa試劑盒 Human free fatty acids, FFA Elisa Kit 96T/48T
人骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒 Human osteonectin, ON Elisa Kit 96T/48T
人(FA)elisa試劑盒 Human Folic acid, FA Elisa Kit 96T/48T
人內(nèi)毒素(ET)elisa試劑盒 Human endotoxin, ET Elisa Kit 96T/48T
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒 Human Peroxisome Proliferator-activated receptor γ, PPAR-γ Elisa Kit 96T/48T
人A(CsA)elisa試劑盒 Human Cyclosporine A, CsA Elisa Kit 96T/48T
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)elisa試劑盒 Human glial fibrillary acidic protein, GFAP Elisa Kit 96T/48T
人15脂加氧酶(15-LO/LOX)elisa試劑盒 Human 15-lipoxygenase, 15-LO/LOX Elisa Kit 96T/48T
人酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa試劑盒 Human glial fibrillary acidic protein, GFAP Elisa Kit 96T/48T
人白三烯C4(LTC4)elisa試劑盒 Human Leukotriene C4, LT-C4 Elisa Kit 96T/48T
人(Cyt-C)elisa試劑盒 Human Cytochrome-C, Cyt-C Elisa Kit 96T/48T
人脂蛋白脂酶(LPL)elisa試劑盒 Human lipoprotein lipase, LPL Elisa Kit 96T/48T
人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)elisa試劑盒 Human Glycogen phosphorylase II, GP-II Elisa Kit 96T/48T
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)elisa試劑盒 Human Glycogen phosphorylase MM, GP-MM Elisa Kit 96T/48T
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)elisa試劑盒 Human Glycogen phosphorylase BB, GP-BB Elisa Kit 96T/48T
人脂蛋白α(Lp-α)elisa試劑盒 Human lipoprotein α, Lp-α Elisa Kit 96T/48T
人骨膠原交聯(lián)(Cr)elisa試劑盒 Human Crosslaps, Cr Elisa Kit 96T/48T
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)elisa試劑盒 Human cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen, CⅠCP Elisa Kit 96T/48T
人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒 Human deoxypyridinoline, DPD Elisa Kit 96T/48T
人吡啶交聯(lián)物(PY)elisa試劑盒 Human pyridinium crosslink/PyriLinks, PY Elisa Kit 96T/48T
人骨橋素(OPN)elisa試劑盒 Human Osteopontin, OPN Elisa Kit 96T/48T
人γ氨基丁酸(GABA)elisa試劑盒 Human Gamma-aminobutyric acid, GABA Elisa Kit 96T/48T
人P物質(zhì)受體(SP-R)elisa試劑盒 Human substance P receptor, SP-R Elisa Kit 96T/48T
人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa試劑盒 Human Cyclic guanosine monophosphate, cGMP Elisa Kit 96T/48T
人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)elisa試劑盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2, Lp-PL-A2 Elisa Kit 96T/48T
人內(nèi)皮脂肪酶(EL)elisa試劑盒 Human Endothelial lipase, EL Elisa Kit 96T/48T
人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )elisa試劑盒 Human skeletal muscle Actinin-α, sm Actinin-α Elisa Kit 96T/48T
人骨成型蛋白7(BMP-7)elisa試劑盒 Human Bone morphogenetic protein 7, BMP-7 Elisa Kit 96T/48T
人25羥基3(25(OH)D3/25 HVD3)elisa試劑盒 Human 25-Dihydroxy vitamin D3, HVD3 Elisa Kit 96T/48T
人白三烯B4(LTB4) elisa試劑盒 Human Leukotriene B4, LT-B4 Elisa Kit 96T/48T
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa試劑盒 Human intestinal fatty acid binding protein, iFABP Elisa Kit 96T/48T
大鼠一氧化氮(NO)elisa試劑盒 Rat nitric oxide, NO Elisa Kit 96T/48T
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa試劑盒 Human oxidized lowdensity lipoprotein, OxLDL Elisa Kit 96T/48T
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)elisa試劑盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1, MPIF-1 Elisa Kit 96T/48T