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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY
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【簡(jiǎn)單介紹】
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY
,采用干冰保存運(yùn)輸收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY
的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞來(lái)自骨髓瘤細(xì)胞系 NS-1;由于次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HPRT、HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(APRT)缺陷導(dǎo)致該細(xì)胞對(duì)腺苷和的類似物抵抗。在氨基蝶呤、腺嘌呤和胸腺嘧啶存在的條件下,當(dāng)該細(xì)胞作為永生化細(xì)胞與Rb(8.12)易位的雌性小鼠的B細(xì)胞融合時(shí),會(huì)產(chǎn)生Ig重鏈基因位點(diǎn)的陽(yáng)性選擇;Ig重鏈基因的選擇可使雜交瘤細(xì)胞更穩(wěn)定地合成抗體。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  維持細(xì)胞濃度在2×105~1×106 cells/ml之間;2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  -
同工酶
染色體  50~60

使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)elisa試劑盒 Human osteoclast differentiation factor, ODF Elisa Kit 96T/48T
人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)elisa試劑盒 Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks, OH-PYD Elisa Kit 96T/48T
人脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)elisa試劑盒 Human Deoxypyridinoline crosslinks, DPD Elisa Kit 96T/48T
人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)elisa試劑盒 Human Pyridinoline crosslinks, PYD Elisa Kit 96T/48T
人葡萄球菌蛋白A(SPA)elisa試劑盒 Human Staphylococal protein A, SPA Elisa Kit 96T/48T
人刀豆素A(ConA)elisa試劑盒 Human concanavalin A, ConA Elisa Kit 96T/48T
人游離原卟啉(FEP)elisa試劑盒 Human Free erythrocyte proloporphyrin, FEP Elisa Kit 96T/48T
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)elisa試劑盒 Human lipolysaccharide binding protein, LBP Elisa Kit 96T/48T
人過(guò)氧化酶(GSH-Px)elisa試劑盒 Human Glutathione peroxidase, GSH-Px Elisa Kit 96T/48T
人(GSH)elisa試劑盒 Human glutathione, GSH Elisa Kit 96T/48T
人17-酮類固醇(17-KS)elisa試劑盒 Human 17-ketosteroids, 17-KS Elisa Kit 96T/48T
人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒 Human 17-Hydroxycorticosteroids, 17-OHCS Elisa Kit 96T/48T
人組織蛋白酶K(cath-K)elisa試劑盒 Human Cathepsin K, cath-K Elisa Kit 96T/48T
人骨形成蛋白(BMPs)elisa試劑盒 Human bone morphogenetic proteins, BMPs Elisa Kit 96T/48T
人結(jié)合蛋白4(RBP-4)elisa試劑盒 Human Retinol binding protein 4, RBP-4 Elisa Kit 96T/48T
人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)elisa試劑盒 Human proteolipid protein, PLP Elisa Kit 96T/48T
人垂草扁桃酸(VMA) elisa試劑盒 Human vanillylmandelic acid, VMA Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)elisa試劑盒 Human glucokinase regulatory protein, GKRP Elisa Kit 96T/48T
人血凝素(HA)elisa試劑盒 Human hemagglutinin, HA Elisa Kit 96T/48T
人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)elisa試劑盒 Human adipose differentiation-related protein, ADRP Elisa Kit 96T/48T
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)elisa試劑盒 Human Caldesmon, CALD Elisa Kit 96T/48T
人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)elisa試劑盒 Human calcineurin, CaN Elisa Kit 96T/48T

人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)elisa試劑盒 Human CTX-2 Elisa Kit 96T/48T
人鈣結(jié)合蛋白(CR)elisa試劑盒 Human Calretinin, CR Elisa Kit 96T/48T
人骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒 Human Bone Morphogenetic Protein 6, BMP-6 Elisa Kit 96T/48T
人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)elisa試劑盒 Human fatty acid-binding protein, FABP Elisa Kit 96T/48T
人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)elisa試劑盒 Human ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1 Elisa Kit 96T/48T
人羥糖蛋白(HRGP)elisa試劑盒 Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein, HRGP Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)elisa試劑盒 Human Glucose transporter 1, GLUT1 Elisa Kit 96T/48T
人低密度脂蛋白(LDL)elisa試劑盒 Human low density lipoprotein, LDL Elisa Kit 96T/48T
人花生四烯酸(AA)elisa試劑盒 Human Arachidonic Acid, AA Elisa Kit 96T/48T
人骨涎蛋白(BSP)elisa試劑盒 Human bone sialoprotein, BSP Elisa Kit 96T/48T
人骨堿性磷酸酶(BALP)elisa試劑盒 Human bone alkaline phosphatase, BALP Elisa Kit 96T/48T
人(CTX)elisa試劑盒 Human Cyclophosphamide, CTX Elisa Kit 96T/48T
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)elisa試劑盒 Human 1, 3-Disphosphoglycerate, 1, 3-DPG Elisa Kit 96T/48T
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)elisa試劑盒 Human 1, 5-anhydroglucitol, 1, 5-AG Elisa Kit 96T/48T
人β羥丁酸(β-OHB)elisa試劑盒 Human Beta-Hydroxybutyric Acid, β-OHB Elisa Kit 96T/48T
人高密度脂蛋白(HDL-C)elisa試劑盒 Human High density lipoprotein cholesterol, HDL-C Elisa Kit 96T/48T
人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)elisa試劑盒 Human N-MID Osteocalcin, N-MID-OT Elisa Kit 96T/48T
 



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