上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:48:37瀏覽次數(shù):268
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供小鼠原B細(xì)胞株;BaF3的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 小鼠原B細(xì)胞株;BaF3
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 生物法檢測生長因子活性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;IL-3
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 58~64
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Elisa Kit 96T/48T
人/苯丙酸去(NP)elisa試劑盒 Human Nandrolone Phenylpropionate, NP Elisa Kit 96T/48T
人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)elisa試劑盒 Human 16-αHydroxyestrogen 1, 16-α OHE-1 Elisa Kit 96T/48T
人(HYD)elisa試劑盒 Human Hydrocortisone, HYD Elisa Kit 96T/48T
人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)elisa試劑盒 Human glucocorticoid receptor-β, GR-β Elisa Kit 96T/48T
人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)elisa試劑盒 Human glucocorticoid receptor-α, GR-α Elisa Kit 96T/48T
人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)elisa試劑盒 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine, u-T3 Elisa Kit 96T/48T
人黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone, LHRH Elisa Kit 96T/48T
人8異前列腺素(8-iso-PG)elisa試劑盒 Human 8-iso prostaglandin, 8-iso-PG Elisa Kit 96T/48T
人腎素(Renin)elisa試劑盒 Human Renin Elisa Kit 96T/48T
人腎上腺素(EPI)elisa試劑盒 Human Epinephrine/Adrenaline, EPI Elisa Kit 96T/48T
人雌二醇受體(ER)elisa試劑盒 Human Estradiol receptor, ER Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)elisa試劑盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein, PTHrP Elisa Kit 96T/48T
人血管緊張素原(aGT)elisa試劑盒 Human angiotensinogen, aGT Elisa Kit 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)elisa試劑盒 Human angiotension Ⅰ, Ang-Ⅰ Elisa Kit 96T/48T
人卵泡抑素(FS)elisa試劑盒 Human Follistatin, FS Elisa Kit 96T/48T
人甲狀腺素抗體(TAb)elisa試劑盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein, PTHrP Elisa Kit 96T/48T
人兒茶酚胺(CA)elisa試劑盒 Human catecholamine, CA Elisa Kit 96T/48T
人半蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)elisa試劑盒 Human Cystatin C, Cys-C Elisa Kit 96T/48T
人乙酰受體抗體(AChRab)elisa試劑盒 Human acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa Kit 96T/48T
人5羥色胺(5-HT)elisa試劑盒 Human 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa Kit 96T/48T
人抑制素A(INH-A)elisa試劑盒 Human Inhibin, INH-A Elisa Kit 96T/48T
人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)elisa試劑盒 Human sex hormone-binding globulin, SHBG Elisa Kit 96T/48T
人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)elisa試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone S7, DHEA-S7 Elisa Kit 96T/48T
人脫氫表雄酮(DHEA)elisa試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone, DHEA Elisa Kit 96T/48T
人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)elisa試劑盒 Human calcitonin gene related peptide, CGRP Elisa Kit 96T/48T
人(SS)elisa試劑盒 Human Somatostatin, SS Elisa Kit 96T/48T
人生長激素釋放多肽(GHRP) elisa試劑盒 Human Growth Hormone Releasing Peptide, GHRP Elisa Kit 96T/48T
人抑制素B(INH-B)elisa試劑盒 Human inhibin B, INH-B Elisa Kit 96T/48T
人促甲狀腺素釋放激素(TRH)elisa試劑盒 Human growth hormone releasing hormone, GHRH Elisa Kit 96T/48T
人雌激素(E)elisa試劑盒 Human estrogen, E Elisa Kit 96T/48T
人褪黑素(MT)elisa試劑盒 Human Melatonin, MT Elisa Kit 96T/48T
人6酮前列腺素(6-K-PG)elisa試劑盒 Human 6-keto-prostaglandin, 6-K-PG Elisa Kit 96T/48T
人血栓素B2(TXB2)elisa試劑盒 Human Thromboxane B2, TX-B2 Elisa Kit 96T/48T
人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)elisa試劑盒 Human Corticosterone, CORT Elisa Kit 96T/48T
人前列腺素E2(PGE2)elisa試劑盒 Human Prostaglandin E2, PG-E2 Elisa Kit 96T/48T
人雙氫睪酮(DHT)elisa試劑盒 Human Dihydrotestosterone, DHT Elisa Kit 96T/48T