上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:50:20瀏覽次數(shù):348
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細(xì)胞名稱 小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞來源于小鼠平滑肌樣腫瘤組織;可產(chǎn)生腺苷酸磷酸激酶和肌酸磷酸激酶;表達(dá)乙酰受體和H-2K,類似骨骼肌細(xì)胞分化停滯的狀態(tài),而非平滑肌細(xì)胞;鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:2~1:10傳代;每周換液2次。
傳代情況 P18
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1
實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)elisa試劑盒 Human corticotropin-releasing factor, CRF 96T/48T
人/1-去氨基-8-右旋-加壓素(dDAVP)elisa試劑盒 Human /1-desamino-8-D-arginine vasopressin, dDAVP Elisa Kit 96T/48T
人毒蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)elisa試劑盒 Human muscarinic acetylcholine receptor M3, M-AChR M3 Elisa Kit 96T/48T
人睪酮受體(TR)elisa試劑盒 Human Testoterone recepter, TR Elisa Kit 96T/48T
人毒蕈堿型乙酰受體(M-AChR)elisa試劑盒 Human muscarinic acetylcholine receptor, M-AChR Elisa Kit 96T/48T
人糖蛋白49A(Gp49a)elisa試劑盒 human glycoprotein 49A, Gp49a Elisa Kit 96T/48T
人抑制素β-B(Inhbb)elisa試劑盒 human inhibin beta-B, Inhbb Elisa Kit 96T/48T
人食欲素受體(OXR)elisa試劑盒 Human Orexin receptor, OXR Elisa Kit 96T/48T
人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa試劑盒 Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin, GHRP-Ghrelin Elisa Kit 96T/48T
人鈣調(diào)素(CAM)elisa試劑盒 Human calmodulin, CAM Elisa Kit 96T/48T
人真胰島素(TI)elisa試劑盒 Human true insulin, TI Elisa Kit 96T/48T
人重酒石酸(NE-B)elisa試劑盒 Human Noradrenaline Bitartas, NE-B Elisa Kit 96T/48T
人前列環(huán)素(PGI)elisa試劑盒 Human prostacycline, PGI Elisa Kit 96T/48T
人降鈣素原(PCT)elisa試劑盒 Human Procalcitonin, PCT Elisa Kit 96T/48T
人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)elisa試劑盒 Human ReverseTri-iodothyronine, rT3 Elisa Kit 96T/48T
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)elisa試劑盒 Human 6-keto-prostaglandin F1a, 6-K-PGF1a Elisa Kit 96T/48T
人戊糖素(Pentosidine)elisa試劑盒 Human Pentosidine Elisa Kit 96T/48T
人變腎上腺素(MN) elisa試劑盒 Human metanephrine, MN Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺D1受體(D1R)elisa試劑盒 Human Dopamine D1 receptor, D1R Elisa Kit 96T/48T
人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)elisa試劑盒 Human adrenergic alpha-1A receptor, ADRA1A Elisa Kit 96T/48T
人早老素2(PS-2)elisa試劑盒 Human Presenilin 2, PS-2 Elisa Kit 96T/48T
人異丙腎上腺素(iso-Hyd)elisa試劑盒 Human Isoprenaline Hydrochloride, iso-Hyd Elisa Kit 96T/48T
人胰抑制素(Pancreastatin)elisa試劑盒 Human Pancreastatin Elisa Kit 96T/48T
人雄激素受體(AR)elisa試劑盒 Human androgen receptor, AR Elisa Kit 96T/48T
人松弛肽/松弛素(RLN)elisa試劑盒 Human Relaxin, RLN Elisa Kit 96T/48T
人生長激素結(jié)合蛋白(GHBP)elisa試劑盒 Human Growth Hormone Binding Protein, GHBP Elisa Kit 96T/48T
人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa試劑盒 Human adrenomedullin, ADM Elisa Kit 96T/48T
人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)elisa試劑盒 Human Immunoreactive growth hormone, irGH Elisa Kit 96T/48T
人硫酸褪黑色素(MS)elisa試劑盒 Human melatonin sulfate, MS Elisa Kit 96T/48T
人甲狀腺刺激素(LATS)elisa試劑盒 Human Long acting thyroid stimulator, LATS Elisa Kit 96T/48T
人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa試劑盒 Human adrenomedullin, ADM Elisa Kit 96T/48T
人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)elisa試劑盒 Human Immunoreactive growth hormone, irGH Elisa Kit 96T/48T
人抗利尿激素/血管加壓素/加壓素(ADH/VP/AVP)elisa試劑盒 Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin, ADH/VP/AVP Elisa Kit 96T/48T
人甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa試劑盒 Human galanin, GAL Elisa Kit 96T/48T
人促胰液素/分泌素受體(SR)elisa試劑盒 Human secretin receptor, SR Elisa Kit 96T/48T
人雌激素受體(ER)elisa試劑盒 Human Estrogen Receptor, ER Elisa Kit 96T/48T
人超敏生長激素(U S-GH)elisa試劑盒 Human Ultra Sensitive growth hormone, U S-GH Elisa Kit 96T/48T