上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-09 09:54:06瀏覽次數(shù):315
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03
的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 2003年建系,利用Ca761皮下移植瘤組織進(jìn)行原代培養(yǎng)、傳代、鑒定后建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P18
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 70~82
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
antibody, BPI-Ab Elisa Kit 96T/48T
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)elisa試劑盒 Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG, MPO-ANCA IgG Elisa Kit 96T/48T
人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)elisa試劑盒 Human Anti-proteinase 3 antibody IgG, PR3 Ab-IgG Elisa Kit 96T/48T
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)elisa試劑盒 Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA, α-Fodrin IgG/IgA Elisa Kit 96T/48T
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)elisa試劑盒 human single stranded DNA Antibody, ssDNA Elisa
Kit 96T/48T
人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體elisa試劑盒 Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody Elisa Kit 96T/48T
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa試劑盒 Human anti-double stranded DNA, dsDNA Elisa Kit 96T/48T
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)elisa試劑盒 human anti-nucleosome antibody IgG, AnuA-IgG Elisa Kit 96T/48T
人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)elisa試劑盒 Human anti-scl70 antibody, SCL70/topoⅠElisa Kit 96T/48T
人抗SS-B/La抗體elisa試劑盒 Human SS-B/La Antibody, Elisa Kit 96T/48T
人落葉型天皰瘡抗體(PF)elisa試劑盒 Human Pemphigus Foliaceus, PF Elisa Kit 96T/48T
人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)elisa試劑盒 Human β2-Glycoprotein 1 antibody IgA, β2-GP1 Ab IgA Elisa Kit 96T/48T
人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)elisa試劑盒 Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM, β2-GP1 Ab IgM Elisa Kit 96T/48T
人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)elisa試劑盒 Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG, β2-GP1 Ab IgG Elisa Kit 96T/48T
人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa試劑盒 Human anti-cardiolipin antibody IgA, ACA-IgA Elisa Kit 96T/48T
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)elisa試劑盒 Human anti-cardiolipin antibody IgM, ACA-IgM Elisa Kit 96T/48T
人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)elisa試劑盒 Human anti-cardiolipin antibody IgG, ACA-IgG Elisa Kit 96T/48T
人抗高爾基體抗體(AGAA)elisa試劑盒 Human anti-golgi apparatus antibody, AGAA Elisa Kit 96T/48T
人沙眼衣原體(CT)elisa試劑盒 Human Chlamydia trachomatis, CT Elisa Kit 96T/48T
人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)elisa試劑盒 human S100 calcium binding protein A9/calgranulin B, S100A9 Elisa Kit 96T/48T
人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)elisa試劑盒 human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A, S100A8 Elisa Kit 96T/48T
人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)elisa試劑盒 human proviral integration site 1, Pim1 Elisa Kit 96T/48T
人綠膿桿菌外毒素A(PEA)elisa試劑盒 Human Pseudomonas Exotoxin A, PEA Elisa Kit 96T/48T
人流感病毒A(FLU A)elisa試劑盒 Human Influenza viruses A, FLU A Elisa Kit 96T/48T
人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa試劑盒 Human hepatitis B virus surface antigen, HBsAg Elisa Kit 96T/48T
人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)elisa試劑盒 Human anti-hepatitis B virus core antibody, HBcAb Elisa Kit 96T/48T
人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)elisa試劑盒 Human anti-hepatitis B virus core IgM, HBc-IgM antibody Elisa Kit 96T/48T
人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)elisa試劑盒 Human anti-hepatitis B virus surface antibody, HBsAb Elisa Kit 96T/48T
人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)elisa試劑盒 Human anti-hepatitis B virus e antibody, HBeAb Elisa Kit 96T/48T
人抗流行性出血熱病毒抗體IgM (EHF)elisa試劑盒 Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody, EHF IgM Elisa Kit 96T/48T
人抗狂犬病毒抗體(anti-RV)elisa試劑盒 Human anti-rabies virus antibody, anti-RV Elisa Kit 96T/48T