上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 10:02:07瀏覽次數(shù):327
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1
的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織,含SV40病毒的DNA序列,保留了皮質(zhì)集合管的某些特性,如形態(tài)和CCD(皮質(zhì)結(jié)合管)抗原。大多M-1細(xì)胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細(xì)胞或主細(xì)胞的特征;5%~10%的細(xì)胞有閏細(xì)胞和主細(xì)胞的雙重表型。當(dāng)該細(xì)胞在滲透性支持物上生長時,可形成具有負(fù)跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu)。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒 Human Thioredoxin, Trx Elisa Kit 96T/48T
人窖蛋白(Cav-1)elisa試劑盒 Human Caveolin-1, Cav-1 Elisa Kit 96T/48T
人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)elisa試劑盒 Human common acute lymphocytic leukaemia antigen, CALLA Elisa Kit 96T/48T
人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)elisa試劑盒 Human melanocyte stimulating hormone, MSH Elisa Kit 96T/48T
人表皮角蛋白(EK)elisa試劑盒 Human epidermal keratin, EK Elisa Kit 96T/48T
人細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)elisa試劑盒 Human cytokeratin fragment antigen 21-1, CYFRA21-1 Elisa Kit 96T/48T
人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)elisa試劑盒 Human carbohydrate-deficient transferrin, CDT Elisa Kit 96T/48T
人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)elisa試劑盒 Human desmogleins 1, DGS-E1 Elisa Kit 96T/48T
人腫瘤標(biāo)志物(CA724)elisa試劑盒 Human CA724 Elisa Kit 96T/48T
人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)elisa試劑盒 Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL Elisa Kit 96T/48T
人非小細(xì)胞肺癌抗原(LTA)elisa試劑盒 Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen, LTA Elisa Kit 96T/48T
人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)elisa試劑盒 Human tumor marker DR-70 for lung cancer, DR-70TM Elisa Kit 96T/48T
人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)elisa試劑盒 Human fetal sulfoslycoprotein antigen, FSA Elisa Kit 96T/48T
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1
人本周蛋白(BJP) elisa試劑盒 Human Bence-Jones protein, BJP Elisa Kit 96T/48T
人癌胚鐵蛋白(CEF) elisa試劑盒 Human Carcinoembryonic Ferritin, CEF Elisa Kit 96T/48T
人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)elisa試劑盒 Human squamous cell carcinoma related antigen, SCCAg Elisa Kit 96T/48T
人腫瘤特異性抗原(TSA) elisa試劑盒 Human tumor specific antigen, TSA Elisa Kit 96T/48T
人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)elisa試劑盒 Human melanoma metastasis surface adhesion molecule, MMSAM Elisa Kit 96T/48T
人癌易感蛋白2(BRCA-2)elisa試劑盒 Human breast cancer susceptibility protein 2, BRCA-2 Elisa Kit 96T/48T
人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)elisa試劑盒 Human apoptosis signal regulating kinase 1, ASK-1 Elisa Kit 96T/48T
人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)elisa試劑盒 Human apoptosis signal regulating kinase 1, ASK-1 Elisa Kit 96T/48T
人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa試劑盒 Human Bcl-2 associated X protein, Bax Elisa Kit 96T/48T
人轉(zhuǎn)移因子(TF)elisa試劑盒 Human Transfer factor, TF Elisa Kit 96T/48T
人結(jié)腸癌抗原(CCA)elisa試劑盒 Human Colon Cancer Antigen, CCA Elisa Kit 96T/48T
人H-ras elisa試劑盒 Human H-ras Elisa Kit 96T/48T
人c-sis elisa試劑盒 Human c-sis Elisa Kit 96T/48T
人c-jun elisa試劑盒 Human c-jun Elisa Kit 96T/48T
人c-fos elisa試劑盒 Human c-fos Elisa Kit 96T/48T
人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)elisa試劑盒 Human c-myc Oncogene product, c-myc Elisa Kit 96T/48T
人Smad1 elisa試劑盒 Human Mothers against decapentaplegic homolog 1, Smad1 Elisa Kit 96T/48T
人Smad7 elisa試劑盒 Human Mothers against decapentaplegic homolog 7, Smad7 Elisa Kit 96T/48T
人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)elisa試劑盒 Human tumor-associated antigen, TAA Elisa Kit 96T/48T
人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)elisa試劑盒 Human TGF-beta-inducible early response gene-1, TIEG1 Elisa Kit 96T/48T
人腫瘤血管生長因子(TAF)elisa試劑盒 Human tumor angiogenesis factors, TAF Elisa Kit 96T/48T
人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)elisa試劑盒 Human cytokeratin 20, CK-20 Elisa Kit 96T/48T