上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-09 10:36:58瀏覽次數(shù):288
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細(xì)胞名稱 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞來源免疫人扁桃體細(xì)胞小鼠,取其脾細(xì)胞與 P3X63Ag8骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
白介素9受體(IL9R)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL9R ELISA Kit
白介素9(IL9)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL9 ELISA Kit
白介素8受體β(IL8Rβ)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL8Rβ ELISA Kit
白介素8受體α(IL8Rα)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL8Rα ELISA Kit
白介素8(IL8)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL8 ELISA Kit
白介素7受體(IL7R)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL7R ELISA Kit
白介素7(IL7)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL7 ELISA Kit
白介素6受體(IL6R)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL6R ELISA Kit
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白介素5受體α(IL5Rα)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL5Rα ELISA Kit
白介素5(IL5)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL5 ELISA Kit
白介素4誘導(dǎo)蛋白1(IL4I1)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL4I1 ELISA Kit
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白介素4(IL4)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL4 ELISA Kit
白介素3受體α(IL3Rα)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL3Rα ELISA Kit
白介素35(IL35)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL35 ELISA Kit
白介素34(IL34)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL34 ELISA Kit
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白介素32(IL32)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL32 ELISA Kit
白介素31(IL31)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL31 ELISA Kit
白介素3(IL3)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL3 ELISA Kit
白介素2受體β(IL2Rβ)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL2Rβ ELISA Kit
白介素2受體α(IL2Rα)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL2Rα ELISA Kit
白介素29(IL29)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL29 ELISA Kit
白介素28受體(IL28R)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL28R ELISA Kit
白介素28B(IL28B)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL28B ELISA Kit
白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL28A ELISA Kit
白介素27(IL27)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL27 ELISA Kit
白介素26(IL26)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL26 ELISA Kit
白介素25(IL25)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL25 ELISA Kit
白介素23受體(IL23R)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL23R ELISA Kit
白介素23(IL23)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL23 ELISA Kit
白介素22受體α2(IL2Rα2)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL2Rα2 ELISA Kit
白介素22受體(IL2R)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL2R ELISA Kit
白介素22(IL22)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL22 ELISA Kit
白介素21受體(IL21R)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL21R ELISA Kit
白介素21(IL21)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL21 ELISA Kit
白介素20(IL20)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL20 ELISA Kit
白介素2(IL2)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IL2 ELISA Kit
白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶4(IRAK4)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IRAK4 ELISA Kit
白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶3(IRAK3)ELISA試劑盒 * ,英文名: IRAK3 ELISA Kit
白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶2(IRAK2)ELISA試劑盒 * ,英文名: IRAK2 ELISA Kit
白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶1(IRAK1)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: IRAK1 ELISA Kit
白介素1受體輔助蛋白樣蛋白2(IL1RAPL2)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: IL1RAPL2 ELISA Kit
白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL1RAP ELISA Kit
白介素1受體Ⅱ(IL1R2)ELISA試劑盒 * ,英文名: IL1R2 ELISA Kit