上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 10:39:25瀏覽次數(shù):289
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細(xì)胞名稱 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP
形態(tài)特性 梭形,胞突呈分枝狀,常有大小粗細(xì)不等的胞突
生長特性 貼壁生長
特征特性 GFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP
實(shí)驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)ELISA試劑盒 * ,英文名: HNRPA2B1 ELISA Kit
不均一核核糖核蛋白U(HNRPU)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: HNRPU ELISA Kit
不均一核核糖核蛋白K(HNRPK)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: HNRPK ELISA Kit
補(bǔ)體應(yīng)答基因32(RGC32)ELISA試劑盒 * ,英文名: RGC32 ELISA Kit
補(bǔ)體因子P(CFP)ELISA試劑盒 * ,英文名: CFP ELISA Kit
補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白3(CFHR3)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: CFHR3 ELISA Kit
補(bǔ)體因子B(CFB)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: CFB ELISA Kit
補(bǔ)體受體4(CR4)ELISA試劑盒 * ,英文名: CR4 ELISA Kit
補(bǔ)體受體2(CR2)ELISA試劑盒 * ,英文名: CR2 ELISA Kit
補(bǔ)體成分9(C9)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: C9 ELISA Kit
補(bǔ)體成分8γ(C8γ)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: C8γ ELISA Kit
補(bǔ)體成分8β(C8β)ELISA試劑盒 * ,英文名: C8β ELISA Kit
補(bǔ)體成分7(C7)ELISA試劑盒 * ,英文名: C7 ELISA Kit
補(bǔ)體成分6(C6)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: C6 ELISA Kit
補(bǔ)體成分5a(C5a)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: C5a ELISA Kit
補(bǔ)體成分5(C5)ELISA試劑盒 * ,英文名: C5 ELISA Kit
補(bǔ)體成分4d(C4d)ELISA試劑盒 * ,英文名: C4d ELISA Kit
補(bǔ)體成分4b(C4b)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: C4b ELISA Kit
補(bǔ)體成分4(C4)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: C4 ELISA Kit
補(bǔ)體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒 * ,英文名: C3aR1 ELISA Kit
補(bǔ)體成分3(C3)ELISA試劑盒 * ,英文名: C3 ELISA Kit
補(bǔ)體成分2(C2)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: C2 ELISA Kit
補(bǔ)體成分1s(C1s)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: C1s ELISA Kit
補(bǔ)體成分1r(C1r)ELISA試劑盒 * ,英文名: C1r ELISA Kit
補(bǔ)體成分1q子成分樣蛋白1(C1qL1)ELISA試劑盒 * ,英文名: C1qL1 ELISA Kit
補(bǔ)體成分1q子成分C(C1qC)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: C1qC ELISA Kit
補(bǔ)體成分1q子成分A(C1qA)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: C1qA ELISA Kit
補(bǔ)體C5轉(zhuǎn)化酶(C5c)ELISA試劑盒 * ,英文名: C5c ELISA Kit
補(bǔ)體C3轉(zhuǎn)化酶(C3c)ELISA試劑盒 * ,英文名: C3c ELISA Kit
補(bǔ)體3a(C3a)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: C3a ELISA Kit
補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: C1INH ELISA Kit
水解酶(BLMH)ELISA試劑盒 * ,英文名: BLMH ELISA Kit
玻璃體蛋白(VIT)ELISA試劑盒 * ,英文名: VIT ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: PDP ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: PDK4 ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶β(PDHβ)ELISA試劑盒 * ,英文名: PDHβ ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶α(PDHα)ELISA試劑盒 * ,英文名: PDHα ELISA Kit
丙酮酸羧化酶(PC)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: PC ELISA Kit
丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TPI1 ELISA Kit
氨肽酶(AAP)ELISA試劑盒 * ,英文名: AAP ELISA Kit
//半/轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ASCT1)ELISA試劑盒 * ,英文名: ASCT1 ELISA Kit
別孕烯醇酮(AP)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: AP ELISA Kit
表皮轉(zhuǎn)酶(TGM3)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TGM3 ELISA Kit
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)ELISA試劑盒 * ,英文名: EREG ELISA Kit
表皮生長因子途徑底物蛋白3(EPN3)ELISA試劑盒 * ,英文名: EPN3 ELISA Kit
表皮生長因子途徑底物蛋白2(EPN2)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: EPN2 ELISA Kit
表皮生長因子途徑底物蛋白1(EPN1)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: EPN1 ELISA Kit
表皮生長因子受體2(EGFR2)ELISA試劑盒 * ,英文名: EGFR2 ELISA Kit
表皮膜蛋白3(EMP3)ELISA試劑盒 * ,英文名: EMP3 ELISA Kit
表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SPJ ELISA Kit