上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-09 11:36:19瀏覽次數(shù):362
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細(xì)胞名稱 轉(zhuǎn)人黏蛋白小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-Muc1
形態(tài)特性 梭形
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS + 800ug/ml G418
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
轉(zhuǎn)人黏蛋白小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-Muc1實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。唾液酸轉(zhuǎn)移酶8C(SIAT8C)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT8C ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶8B(SIAT8B)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SIAT8B ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶8(SIAT8)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: SIAT8 ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶7F(SIAT7F)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT7F ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶7E(SIAT7E)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT7E ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶7D(SIAT7D)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SIAT7D ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶7C(SIAT7C)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: SIAT7C ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶7B(SIAT7B)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT7B ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶7A(SIAT7A)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT7A ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶4C(SIAT4C)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SIAT4C ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶4B(SIAT4B)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: SIAT4B ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶4A(SIAT4A)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT4A ELISA Kit
唾液酸轉(zhuǎn)移酶1(SIAT1)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIAT1 ELISA Kit
唾液酸乙酰酯酶(SIAE)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SIAE ELISA Kit
唾液酸酶4(SIAL4)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: SIAL4 ELISA Kit
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素8(SIGLEC8)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIGLEC8 ELISA Kit
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素3(SIGLEC3)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIGLEC3 ELISA Kit
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素2(SIGLEC2)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SIGLEC2 ELISA Kit
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素12(SIGLEC12)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: SIGLEC12 ELISA Kit
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素10(SIGLEC10)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIGLEC10 ELISA Kit
唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素1(SIGLEC1)ELISA試劑盒 * ,英文名: SIGLEC1 ELISA Kit
唾液富組蛋白3(HTN3)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: HTN3 ELISA Kit
唾液富組蛋白1(HTN1)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: HTN1 ELISA Kit
唾液α1(AMY1)ELISA試劑盒 * ,英文名: AMY1 ELISA Kit
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅲ(TOP3)ELISA試劑盒 * ,英文名: TOP3 ELISA Kit
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2β)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: TOP2β ELISA Kit
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TOP2 ELISA Kit
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(*)ELISA試劑盒 * ,英文名: * ELISA Kit
脫中胚蛋白(EOMES)ELISA試劑盒 * ,英文名: EOMES ELISA Kit
脫氧胸苷酸激酶(DTYMK)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: DTYMK ELISA Kit
脫氧尿苷三磷酸酶(DUT)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: DUT ELISA Kit
脫氧鳥苷激酶(DGUOK)ELISA試劑盒 * ,英文名: DGUOK ELISA Kit
脫氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEⅩ)ELISA試劑盒 * ,英文名: DNASEⅩ ELISA Kit
脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: DNASEⅡ ELISA Kit
脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: DNASE1L2 ELISA Kit
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒 * ,英文名: DNASE1 ELISA Kit
脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)ELISA試劑盒 * ,英文名: DOHH ELISA Kit
脫氧輔蛋白合酶(DHPS)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: DHPS ELISA Kit
脫氧吡啶酚(DPD)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: DPD ELISA Kit
脫氧胞苷激酶(DCK)ELISA試劑盒 * ,英文名: DCK ELISA Kit
脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apoTf)ELISA試劑盒 * ,英文名: apoTf ELISA Kit