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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：CP99591
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
丹皮酚原苷；牡丹酚原甙(標準品)英文名稱： Wilforlide A免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體規(guī)格：25g

丹葉大黃素英文名稱： Forsythoside E胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞基ALS抗體規(guī)格：5g

丹葉大黃素-3'-O-葡萄糖苷英文名稱： Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine豬胰島素單克隆抗體規(guī)格：1g

丹芝B(標準品）英文名稱： EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea ExtractKB抑制蛋白激酶α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體規(guī)格：5g

單白前苷B英文名稱： Deoxycholic acid抗抗體規(guī)格：5g

膽固(標準品)英文名稱： Calcein-AM 磷酸化肌聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體規(guī)格：25g

(標準品)英文名稱： Nicotinamide胰島素受體抗體規(guī)格：5g

膽木（標準品）英文名稱： cucurbitacins胰島素受體α抗體規(guī)格：1g

膽酸(標準品)英文名稱： 5-Hydroxytryptophan（5-HTP）胰島素受體β抗體規(guī)格：5g

淡豆豉（標準品）英文名稱： 5-HydroxytryptophanKB抑制蛋白激酶α/β抗體規(guī)格：10mg

蛋黃磷脂酰英文名稱： Imazapyr acid白介素12抗體規(guī)格：250mg

當歸（標準品）英文名稱： Imazapyr acid干擾素誘導35蛋白抗體規(guī)格：100ml

當歸尾（標準品）英文名稱： Lithocholic Acid完整膜蛋白E25A抗體規(guī)格：1g

當歸?；昝仔?/font>H(標準品)英文名稱： Potassium Oxonate小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體規(guī)格：5g

當歸酰基戈米辛O英文名稱： Potassium Oxonate胰島素降解酶抗體規(guī)格：1g
塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒BNL CL.2(小鼠胚胎肝) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮*培養(yǎng)基100mL 人多發(fā)性骨髓瘤;RPMI-8226 [RPMI8826]

獼猴皮膚;MMS4

CDH5 Others Rat 大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 人裂解液 (陽性對照)

THP-1，人單核白血病 BALB/C小鼠肝上皮,BNL1ME A.7R.1 角質(zhì)生長添加物(不含動物成分)KGS-acf

NCI-H209(人小肺癌) 5×106cells/瓶×2

嬰兒真皮成纖維Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CK20  角蛋白20抗體規(guī)格： 0.2ml

CK1/8/19  角蛋白1/8/19抗體規(guī)格： 0.1ml

CK2  角蛋白2抗體規(guī)格： 0.1ml

CK3  角蛋白3抗體規(guī)格： 0.1ml

CK4  角蛋白4抗體規(guī)格： 0.1ml