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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠表皮角化細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠狀腺原酸(T3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒

Humanβcatenin,β-CatELISAKit 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineaPigcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseChorionicGonadoophin,CGELISAKit小鼠絨毛膜(CG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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小鼠抗復(fù)合物elisa試劑盒   小鼠抗復(fù)合物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗復(fù)合物試劑盒、小鼠抗復(fù)合物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠尿微量蛋白elisa試劑盒   小鼠尿微量蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠尿微量蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠尿微量蛋白試劑盒、小鼠尿微量蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠內(nèi)皮脂肪酶elisa試劑盒   小鼠內(nèi)皮脂肪酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠內(nèi)皮脂肪酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)皮脂肪酶試劑盒、小鼠內(nèi)皮脂肪酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 ，英文名： 17-OHP ELISA Kit

Mouse thyroglobulin (TG) ELISA Kit 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒

Mouseoxytocin,OTELISAKit 小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit人多聚血清蛋白規(guī)格：48T/96T

通用型豬支原體肺炎(Mycoplasmahyopneumoniae;MH)試劑盒20次

ELISAKitET-1大鼠內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T

CCL6重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ABCA1(ATP binding cassette transporter A1 0.5mgABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原

PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠表皮角化細(xì)胞蛋白Z(PROZ)重組蛋白 Recombinant Protein Z (PROZ)

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PLAT重組小鼠 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL6 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白

EPDR1重組人 EPDR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。