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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠附睪上皮分離自附睪組織；附睪（Epididymis）是一個由曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官，一端接著輸精管（Ductusdeferens），一端接著睪丸（Testis）的曲細(xì)精管，具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣，可分為頭、體、尾三部。離開睪丸后通過輸出小管進(jìn)入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)的功能，以促進(jìn)的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存，促進(jìn)的進(jìn)一步成熟。在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動能力，總共停留8～17天，終達(dá)到功能上的成熟。在這個過程中，除了自身的因素，還受到附睪微環(huán)境的影響，這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和形態(tài)的改變?？梢哉f，附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常，則不能成熟，引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞。基細(xì)胞，其頂部離附睪管腔有一定距離，在附睪各部分，其形態(tài)沒有差別，一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞；另一種主細(xì)胞，是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ)，在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大，這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細(xì)胞外，附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化，附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮，而尾部平滑肌就沒有這種特點(diǎn)，僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮。作為負(fù)責(zé)提供適合成熟微環(huán)境的附睪，具有活躍的分泌與吸收功能。其中，附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn)，對保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度，為成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液，如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液，而從附睪排出的只不過幾百微升，也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動物實(shí)驗表明，結(jié)扎輸精管時睪丸不會腫脹，但若結(jié)扎睪丸輸出小管，睪丸天就會腫脹，這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能，但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對的發(fā)育、成熟，，附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。

方法簡介：

實(shí)驗室分離的小鼠附睪上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗室分離的小鼠附睪上皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠肝表達(dá)趨化因子(LEC)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat endotoxin (ET) ELISA Kit 大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒

HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 人Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-typhusaibodyELISA試劑盒人抗斑疹傷寒抗體(ai-typhus-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒50次

HumaoxoplasmaGondii,T.gondiiELISAKit人剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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小鼠16α羥基雌1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠羧肽酶A2(CPA2)ELISA試劑盒 ，英文名： CPA2 ELISA Kit

Mouse glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒

ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHK(MouseHexokinase)ELISAKIT小鼠己糖激酶規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞PRAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit8-OHdG大鼠8羥基脫氧鳥苷規(guī)格：48T/96T

ENTPD1重組小鼠 CD39 / ENTPD1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)

CD300LG重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白 Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠附睪上皮細(xì)胞ADCY1 peptide 腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原 0.5mgADCY1 peptide 腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

FCGR1重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽) Protein

EGFR Protein Rat 重組大鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SAA4重組人 SAA4 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用