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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

小鼠脊髓成纖維分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經系統(tǒng)延伸部分。中樞神經系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區(qū)，主要由神經細胞構成；在灰質區(qū)周圍為白質區(qū)，主要由有髓神經纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié)，31對脊神經就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持組織的正常形態(tài)；合成和釋放細胞外基質；組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠脊髓成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠脊髓成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產品：

小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)ELISA試劑盒 96T/48T

Skin reactive factor / inflammatory factor (SRF/IF) ELISA Kit 人皮膚反應因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA試劑盒

Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 人視網膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISA試劑盒人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20次(10樣本)

MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗受體(A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit

Mouse prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAkit 小鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanBeta-glucosidaseELISAKit人β葡糖苷酶規(guī)格：48T/96

細胞DYRK1A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitFASL大鼠凋亡相關因子配體規(guī)格：48T/96

HSPB1重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白 (His 標簽) Protein

腎素(REN)重組蛋白 Recombinant Renin (REN)

MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 標簽) Protein

CTHRC1 Protein Human 重組人 CTHRC1 蛋白 (His 標簽)

HA Protein Influenza 重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

小鼠脊髓成纖維細胞腎素(REN)重組蛋白 Recombinant Renin (REN)

CTHRC1 Protein Human 重組人 CTHRC1 蛋白 (His 標簽)

HSPB1重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白 (His 標簽) Protein

HA Protein Influenza 重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用