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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠結(jié)腸黏膜上皮分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線(xiàn)。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法，為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat calcitonin gene related peptide (CGRP) ELISA Kit 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒

Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanacidsphingomyelinase,ASMELISA試劑盒人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠抗單核細(xì)胞抗體elisa試劑盒   小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒、小鼠抗單核細(xì)胞抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠釋放激素elisa試劑盒   小鼠釋放激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠釋放激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠釋放激素試劑盒、小鼠釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠促上腺皮質(zhì)激素elisa試劑盒   小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒、小鼠促上腺皮質(zhì)激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素elisa試劑盒   小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒、小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 ，英文名： LH ELISA Kit

Mouse procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2) 48T/96 進(jìn)口分裝

CLIAKitforLHPoulyELISAKitLH禽類(lèi)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒規(guī)格：48T/96

通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitVEGFR-3血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3規(guī)格：48T/96

CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原

VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白 (His 標(biāo)簽)

THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原

CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用