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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠毛囊細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠毛囊分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來(lái)。毛囊開(kāi)口起始于皮膚表面，而每個(gè)毛囊又和一個(gè)或多個(gè)腺胞相連。每個(gè)腺胞解離成富含脂質(zhì)的物質(zhì)，卻又通過(guò)一個(gè)共同和毛囊相通連的皮脂腺導(dǎo)管將分泌物運(yùn)送到皮膚表面排出。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠毛囊經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠毛囊采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠0脂酶A2(PLA-2)Elisa試劑盒 96T/48T

Human common ace lymphocytic leukemia aigen (CALLA) ELISA Kit 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒

HumanInvolucrin,iNVELISAKit 人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanADAMmetallopeptidasewiththrombospondiype1motif4,ADAMTS4ELISA試劑盒人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)過(guò)氧化物異構(gòu)前列腺素(ISOPROSTANE)ELISA定量測(cè)定試劑盒48/96次

Mouseamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠結(jié)合珠蛋白elisa試劑盒   小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠結(jié)合珠蛋白試劑盒、小鼠結(jié)合珠蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠鈣結(jié)合蛋白elisa試劑盒   小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鈣結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠鈣結(jié)合蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠大內(nèi)皮素elisa試劑盒   小鼠大內(nèi)皮素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠大內(nèi)皮素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠大內(nèi)皮素試劑盒、小鼠大內(nèi)皮素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠層連蛋白elisa試劑盒   小鼠層連蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠層連蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠層連蛋白試劑盒、小鼠層連蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠補(bǔ)體C3a(C3a)ELISA試劑盒 ，英文名： C3a ELISA Kit

Mouse plasmin inhibitor, alpha 2 (2-PI) ELISA Kit 小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR) 48T/96 進(jìn)口分裝

CLIAKitforKLK6(HumanKallikrein6)ELISAKit人6規(guī)格：48T/96

通用型產(chǎn)氣莢膜梭茵(Closidiumperfringens)試劑盒20次

ELISAKitcath-K大鼠組織蛋白酶K規(guī)格：48T/96

CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

TNFSF13B重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 Protein

CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白

UCHL3 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠毛囊細(xì)胞H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白

CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

UCHL3 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFSF13B重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。