上海莼試生物技術(shù)有限公司
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上海市
更新時間:2024-10-10 12:51:54瀏覽次數(shù):43
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 牙髓 |
---|---|---|---|
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
組織來源 | 牙髓 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X3560 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡介:
小鼠牙髓干分離自牙髓組織;牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細(xì)小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經(jīng)、血管,淋巴和結(jié)締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質(zhì)細(xì)胞,其作用是造牙本質(zhì)。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機(jī)體抵抗力的差異,出現(xiàn)不同的病理變化,在臨床上會表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時間較長后,轉(zhuǎn)化為急性牙髓炎癥。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠牙髓干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠牙髓干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細(xì)胞VS細(xì)胞系:
用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說,從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞,絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。
原代細(xì)胞一般傳至10代左右,大部分細(xì)胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)",這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,從而可能無限制地傳代下去,稱為細(xì)胞系。
也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系,因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。
細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點,也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。
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