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本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維分離自主動(dòng)脈血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主，當(dāng)血管受損傷時(shí)，成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一，其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒

HumanureaserelatedproteinC,UreCELISAKit 人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISA試劑盒人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5次

HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠雌激素(E)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠白介素6受體(IL-6R)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-6R ELISA Kit

Mouse ierleukin 18 (IL-18) ELISA Kit 小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforINS(MouseInsulin)ELISAKit小鼠胰島素規(guī)格：48T/96T

通用型腐霉屬種(Pythiumspecies)試劑盒20次

ELISAKitITGαM/CD11b大鼠整合素αM型規(guī)格：48T/96T

B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原

S100A10重組人 S100A10 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標(biāo)簽)

UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標(biāo)簽)

B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

S100A10重組人 S100A10 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein