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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠滋養(yǎng)層干分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。滋養(yǎng)層干細(xì)胞是胎盤組織細(xì)胞的祖細(xì)胞，與胚胎著床和胎盤的形成密切相關(guān)。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關(guān)鍵時(shí)期，此時(shí)期滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖速度快，滋養(yǎng)層干細(xì)胞自我更新和分化旺盛，與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調(diào)節(jié)的失常有密切關(guān)系。在哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育過(guò)程中，胚胎細(xì)胞次分化形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)外胚層。滋養(yǎng)層干細(xì)胞是胎盤細(xì)胞的前體細(xì)胞，在胎盤發(fā)育中有重要作用。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠滋養(yǎng)層干經(jīng)HLA-E（白細(xì)胞抗原）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠滋養(yǎng)層干采用囊胚組織貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 96T/48T

Human advanced oxidation protein products (AOPP) ELISA Kit 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒

Humanbonesialoprotein,BSPELISAKit 人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCathepsinAibodies,CathAbELISA試劑盒人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)MS8品系試劑盒20次

humansimilaoRIKENcDNA2010109K09geneELISAKit人類似RIKENcDNA2010109K09基因ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素28（IL-28）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠白介素8(IL-8)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-8 ELISA Kit

Mouse ierleukin 15 (IL-15) ELISA Kit 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠生長(zhǎng)因子(mouse GH) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIP-10/CXCL10(Mouseierferon-inducibleprotein10)ELISAKit小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10規(guī)格：48T/96T

通用型鳳仙花壞死斑病毒(ImpatiensNecroticSpotVirus;INSV)試劑盒20次

ELISAKitLp-PL-A2大鼠脂蛋脂酶A2規(guī)格：48T/96T

ERBB4重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

三葉因子2(TFF2)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 2 (TFF2)

EDNRB重組人 EDNRB / Endothelin B Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞三葉因子2(TFF2)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 2 (TFF2)

EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ERBB4重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EDNRB重組人 EDNRB / Endothelin B Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。