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上海研伴實業(yè)有限公司
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登革熱試劑盒廠家提供詳細的實驗步驟,試劑準備的信息。
登革熱試劑盒是由一種酶聯擴大的兩步法免疫檢測系統。在此實驗中，將登革熱陰性質控、陽性質控和未知濃度的血清樣品用樣品稀釋液稀釋，然后加入到包被 了抗人IgM抗體的微孔中溫育，之后分別加入登革熱源性重組抗原DENVRA和正常細胞抗原（NCA）進行溫育。溫育并洗板后，用HRP標記的DEN特異 性抗體處理。第二次溫育并洗板后，加入TMB底物液進行溫育。之后再加入酸性終止液，450nm處測OD值可確定底物反應的程度。當高于一定數值時（臨界 值），樣品的吸光度值可確定樣品中是否存在登革熱抗體。
登革熱試劑盒樣品的采集與準備：
1）此實驗必須用血清來做。全血和血漿樣本不能直接檢測。
2）不要將不同批次的試劑混亂
3）不要加熱熱滅活的試驗血清
4）實驗前將所有試劑平衡至室溫，溫度的改變會對試驗有影響
5）避免反復凍融樣品血清
6）直接用干凈的槍頭從試劑瓶中移去試劑，不能轉移，避免污染
7）不用的板條應立即放回至密封袋中保存
8）不要使用任何過期的試劑
9）避免試劑暴露受熱或陽光直射
10）有些試劑可能會產生沉淀，使用前一定要混勻
11）洗滌過程不完整會對試驗結果產生影響
12）為了減少由于孵育時間的差異而引起的漂移，建議底物液和終止液加入的時間和速度要*
13）避免試劑中有微生物污染，尤其是酶聯物
14）每一次吸取試劑，標準品，質控品時都應用干凈的槍頭
實驗步驟：
將所有的試劑成分和樣品都平衡至室溫。實驗前反復倒置以混合試劑和樣品。
試劑準備：
1）1X洗滌液的配制：用生物學或高純度水將10倍濃縮型的洗滌液稀釋成1X的洗滌液。為了制備即用型的洗滌緩沖 液，我們可以將120ml 10倍濃縮的洗滌液加入到1080ml蒸餾水或去離子水中，沖洗掉所有晶體，旋渦混合溶液以至所有晶體都溶解掉。制備好的洗滌液可在室溫下穩(wěn)定儲存6個月。使用前請檢查洗滌液是否被污染。
2）包被板的準備：將實驗所需數目的板條置于板架上。將剩余的板條立即裝入包裝袋中，并儲存于2-8℃的環(huán)境下，有效期內穩(wěn)定。
用于定性檢測血清中登革病毒（血清型1、2、3及4型）的IgG抗體，用于臨床實驗室對具有持續(xù)發(fā)燒的登革感染癥狀或接觸史的患者的輔助性診斷。
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