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行業(yè)產(chǎn)品

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上海李記生物科技有限公司


Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)C6242L0520

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:蘇女士查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2017-10-20 10:20:50瀏覽次數(shù):780次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本品為Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色),可發(fā)出高亮度、穩(wěn)定的綠色熒光,染色反應(yīng)特異性強(qiáng),對(duì)比性高,適合用作F-actin的定性和定量檢測(cè)。

詳細(xì)介紹

Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

產(chǎn)品名稱

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Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

C6242L0520

300 T

-20℃

1950

Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。收到貨后-20℃避光干燥保存,1年有效。

Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)使用方法:

1.   準(zhǔn)備1000x DMSO Alexa FluorTM 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽存儲(chǔ)液

30µL DMSO 溶解粉末狀Alexa FluorTM 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽,可按需分裝并于-20℃避光干燥保存,分裝保存,避免反復(fù)凍融。

2.   準(zhǔn)備1x Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液

吸取1µL 1000×Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽存儲(chǔ)液到1ml 含有1%BSAPBS緩沖液中即可得到1×工作液。

注意:不同的細(xì)胞染色的情況不同,相應(yīng)Alexa Fluor 488鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。

3. 細(xì)胞染色步驟

1)細(xì)胞培養(yǎng)過夜或更長(zhǎng),使其密度達(dá)到50-60%匯合度。

2)吸掉培養(yǎng)液,37℃預(yù)熱的1×PBSpH 7.4)清洗細(xì)胞2次。

3)使用含有3-4%甲醛的PBS溶液進(jìn)行細(xì)胞固定,室溫固定10-30min。

注意:避免固定劑中含有甲醇成分,因?yàn)榧状荚诠潭ㄟ^程中可能破壞肌動(dòng)蛋白。

4)室溫條件下,用PBS清洗固定好的細(xì)胞2~3次,每次10min。

5)(可選):室溫條件下,用溶于PBS0.1% Triton X-100溶液透化處理3-5min,從而增加其通透性。

注意:鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細(xì)胞,一般情況下不需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。

6)室溫條件下,用PBS清洗細(xì)胞2~3次,每次10min。

7)每孔加入 Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液100µl/孔(96孔板),室溫避光染色20-90min,夏季時(shí)間相對(duì)短些。

8)用PBS清洗細(xì)胞3次,每次5min,去除掉多余的Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽。

9)(可選):加入足量的即用型DAPI溶液對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染,如:100µl/孔(96孔板),室溫3~5min。用PBS清洗細(xì)胞2次,每次5min

10)于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察,選擇Alexa FluorTM 488激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=493/517nm)和/DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。


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