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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時間：2022-05-30 14:04:29瀏覽次數(shù)：236
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱：凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒
英文名稱：Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
產(chǎn)品規(guī)格：10×0.1mL
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0163415
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒又稱鱟試劑，為鱟科動物東方鱟的血液變形細(xì)胞溶解物的冷凍干燥品。鱟試劑中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在適宜的條件下(溫度，pH值及無干擾物質(zhì))，細(xì)菌內(nèi)毒素激活C因子，引起一系列酶促反應(yīng)，使鱟試劑產(chǎn)生凝集反應(yīng)形成凝膠。 儲存條件：常溫運輸，陰涼處避光保存，有效期兩年。 使用方法： 一、樣品溶液的制備 樣品的pH值應(yīng)在6.0–8.0 之間，若出此范圍，需用無熱原緩沖液或0.1N氫氧化鈉、0.1N 鹽酸調(diào)節(jié)。若樣品中可能存在鱟實驗的干擾物質(zhì)，見本說明書4.2“樣品的干擾實驗"。若樣品中可能含有導(dǎo)致鱟試劑中G 因子旁路反應(yīng)的(1,3)β－D－葡聚糖，需選用不會對(1,3)β－D－葡聚糖起反應(yīng)的特異性鱟試劑。 二：細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液及對照液的準(zhǔn)備 2.1細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液(本試劑盒不提供) ?取細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品1支，按《細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品使用說明書》配制2λ ，1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液(λ為鱟試劑靈敏度標(biāo)示值)。備用。 ?注：鱟試劑靈敏度復(fù)核實驗見本手冊其他常用實驗方案。 2.2 陰性對照液：即無內(nèi)毒素水。 2.3 陽性對照液：即濃度為2λ的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液。 2.4樣品陽性對照液：即添加濃度為2λ內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)的樣品溶液。 三：內(nèi)毒素檢測 3.1 鱟試劑的溶解：按標(biāo)示量(本試劑盒為0.1mL/支)加無內(nèi)毒素水于鱟試劑中，輕輕振搖使鱟試劑*溶解。注意不要引起氣泡，溶解后的試劑應(yīng)在10 min內(nèi)使用(即配即用)。 3.2樣品溶液的制備 ?樣品大有效稀釋倍數(shù)(MVD)的計算： ?MVD＝ C?L/λ ?λ：測試用鱟試劑靈敏度標(biāo)示值(EU/mL)；L：樣品細(xì)菌內(nèi)毒素限值；C：樣品濃度或樣品復(fù)溶后所得樣品濃度。當(dāng)L 單位為EU/mL(溶液)時，C的單位為1mL/mL；當(dāng)L單位為EU/mg或者EU/U時，C的單位為mg/mL或者U/mL。按照計算所得體積，加無內(nèi)毒素水制備樣品溶液。 3.3 各反應(yīng)管中分別加入0.1mL 陰性對照液，陽性對照液，樣品，或樣品陽性對照液。 ?封閉管口，輕輕搖勻，垂直放入37℃的恒溫器中溫育60分鐘±2分鐘，溫育期間避免振動。 3.4 結(jié)果判斷 3.4.1 將試管從恒溫器中輕輕取出，緩慢倒轉(zhuǎn)180°。若管內(nèi)的內(nèi)容物呈堅實凝膠，不變形，不從管壁滑脫為陽性，記錄為(+)；不呈凝膠或雖生成凝膠但不能保持完整并從管壁滑脫為陰性，記錄為(－)。 3.4.2 只有當(dāng)陰性對照管結(jié)果均為陰性，陽性對照管、樣品陽性對照管結(jié)果均為陽性，實驗方有效，否則無效。若陰性對照管為陽性，提示鱟試劑、無內(nèi)毒素水或?qū)嶒炂骶呖赡苁艿轿廴?。若陽性對照管為陰性，提示鱟試劑活性減失、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液效價降低，鱟試劑的靈敏度或內(nèi)毒素的效價標(biāo)示不準(zhǔn)確，或內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋不正確。若樣品陽性對照管為陰性，提示反應(yīng)體系內(nèi)有干擾因素存在。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測試劑盒
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒（帶濾膜）
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒
動物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒
抑制劑 10g Polyphyllin D 50773-41-6 中文名：重樓皂苷D 分子式：C44H70O16 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
檢測 Alkaline phosphatase (AKP) detection Polypodine B 中文名：水龍骨甾酮B 分子式：C27H44O8 度：97.5%
測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Tetracaine 136-47-0 分子式：C15H25ClN2O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
測定試劑盒（紫外比色法） Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 153012-37-4 中文名： 分子式：C28H42N6O8S2
1:250 250g Polyphyllin D 中文名：重樓皂苷D 分子式：C44H70O16 度：98.0%
凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒蟛蜞菊內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg 犬巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 Canine Macrophage-Derived Chemokine,MDC/CCL22 ELISA Kit
霹靂蘿芙木堿 HPLC≥98% 10mg 英文名稱HumapPELISAKit人血栓前體蛋白(TpP)規(guī)格：96T/48T
平貝堿甲 HPLC≥98% 20mg 化線粒體蛋白質(zhì)濃度定量測定試劑盒20
蘋果酸 HPLC≥98% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1elisa大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa規(guī)格：96T/48T
蒲公英賽醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)elisa ，英文名： REG-1a ELISA Kit
蒲公英甾醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒MousecoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T
蒲公英甾醇乙酸酯 HPLC≥98% 10mg 人精脒/精胺N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移酶樣蛋白1(SATL1)試劑盒 Human SATL1 ELISA Kit
HPLC≥98% 20mg RatAngiogenin,ANGELISAKit大鼠血管生長素(ANG)elisa規(guī)格：96T/48T
七葉苷XVII HPLC≥98% 20mg 載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
七葉樹皂苷B HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHelisa小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa規(guī)格：96T/48T
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
