上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-05-30 14:10:54瀏覽次數(shù):193
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:內(nèi)毒素清除試劑盒
英文名稱:Endotoxin removing Kit
產(chǎn)品規(guī)格:1.5mL
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0163416
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒使用的是一類高效內(nèi)毒素清除樹脂,它以修飾過的B(PMB)為配體,進(jìn)行特異性的內(nèi)毒素清除。經(jīng)此專用親和介質(zhì)純化,樣品終的內(nèi)毒素水平可低于0.1 EU/mL。 細(xì)菌內(nèi)毒素(脂多糖,LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分。人們在研究革蘭氏陰性菌血癥和內(nèi)毒素血癥的過程中,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌內(nèi)毒素在其中起著關(guān)鍵的作用,內(nèi)毒素使機(jī)體免疫功能嚴(yán)重受損,進(jìn)一步的發(fā)展可能引發(fā)膿毒性休克,彌散性血管內(nèi)凝血,急性呼吸窘迫綜合癥,全身炎癥反應(yīng)綜合癥或致命性多器官功能衰竭。因此,內(nèi)毒素的清除對于人類疾病治療的注射型藥品、生物制品等都是必須的,尤其對于基因藥物、蛋白藥物、單抗克隆藥物、治療性疫苗、小分子化學(xué)藥物等生物制品的下游純化處理來說就顯得非常重要。 試劑盒特點(diǎn): 1.高穩(wěn)定性,高去除效率。 2.高結(jié)合力:> 2000,000 EU/mL。 3. pH范圍為5-10時(shí),親和介質(zhì)對內(nèi)毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8時(shí),清除效率高。 4. 無需恒流泵即可調(diào)節(jié)流速。 5. 重復(fù)使用 5次不會(huì)改變柱子效果。 6. 使用方便,試劑盒中提供無熱原緩沖液,無熱原收集管及無熱原槍頭等。 7.適合純化對象為蛋白,多肽,抗體,多糖等。 8.可耐受試劑:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐溫-20,10mM DTT等。 儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。 使用方法: 1.樣品處理:樣品的pH值和離子度在內(nèi)毒素去除的過程中起著重要作用。雖然結(jié)合內(nèi)毒素的pH范圍在6-9,但是7-8的pH范圍是純化的佳范圍。合適的離子濃度可以降低非特異性吸附,0.15-0.5 M NaCl的條件可以得到一個(gè)很好的去除效率和低的樣品損失。所以,純化之前可以使用處理過的氯化鈉,0.1 M的氫氧化鈉或0.1 M鹽酸來調(diào)節(jié)離子度或pH值。 2.活化親和介質(zhì):將預(yù)裝柱置于鐵架臺(tái),垂直固定,去除預(yù)裝柱頂部的蓋子,打開流速控制器,使保護(hù)液在重力作用下流干,加入5mL的(預(yù)冷)再生緩沖液,調(diào)節(jié)流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生緩沖液流干,再加入5mL 再生緩沖液,再重復(fù)操作兩次,確保體系保持無熱原(即內(nèi)毒素)存在。即使是次使用也必須進(jìn)行這一步操作。這步操作大約需要60分鐘完成。 3. 平衡親和介質(zhì):活化完畢后,加入6mL的(預(yù)冷)平衡緩沖液,調(diào)節(jié)流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡緩沖液,再按此操作重復(fù)兩次。這步操作大約需要40分鐘完成。 4.內(nèi)毒素清除:將流速控制器關(guān)閉,使用無熱原槍頭將樣品加入,打開控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液體積達(dá)到1.5mL后,使用無熱原接收管接受樣品,樣品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(預(yù)冷)平衡緩沖液淋洗,收集淋洗液。檢測樣品濃度及內(nèi)毒素水平。 5. 再次使用:如果流出樣品內(nèi)毒素水平未能達(dá)到預(yù)期值,需要將預(yù)裝柱重新再生,按照步驟1 重新再生,然后上樣純化。 6. 儲(chǔ)存條件:如果預(yù)裝柱用完后需要保存,先用10mL 平衡緩沖液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生緩沖液(含0.02% |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
真菌/酵母醛酮還原酶(aldo-keto reductase)總活性比色法定量檢測試劑盒
植物醛酮還原酶(aldo-keto reductase)總活性比色法定量檢測試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原酶1A(aldo-keto reductase 1A)活性比色法定量檢測試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原酶1B(aldo-keto reductase 1B)活性比色法定量檢測試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原酶1C(aldo-keto reductase 1C)活性比色法定量檢測試劑盒
FDA水解酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3,5-dichloropyridine 22889-78-7 中文名: 分子式:C5H4Cl2N2
E選擇素 英文名稱: Human E selectin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ES 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S
Ethyleneglycol Oleandrin 465-16-7 中文名: 分子式:C32H48O9
EthidiumBromide(EB) 1ml(10mg/ml) Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9
EosinY,Salt 10x25g Prednisone 21-acetate 125-10-0 中文名:醋酸 分子式:C23H28O6
內(nèi)毒素清除試劑盒 Propafenone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒Ratai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 96T/48T
呫噸酸 Xanthene-9-carboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 人白介素29(IL-29)試劑盒 Human Ierleukin 29,IL-29 ELISA Kit
呫噸酮 Xanthone 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法有關(guān)物質(zhì)檢查用 英文名稱MouseTissuefactorELISAKit小鼠組織因子(TF)規(guī)格:96T/48T
Methyl eugenol 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 pBaBe-PURO+MiRNAMiRNA表達(dá)
香葉醇 Geraniol 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFelisa豬血小板衍生生長因子(PDGF)elisa規(guī)格:96T/48T
Benzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)elisa ,英文名: MBL ELISA Kit
卡維丁 Cavidine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA檢測試劑盒HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 96T/48T
5-羥色胺鹽酸鹽 Serotonin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 大鼠色羥化酶(TPH)試劑盒 Rat yptophan Hydroxylase,TPH ELISA Kit
Evening primrose oil 質(zhì)量規(guī)格:鑒別 英文名稱RatF1+2ELISAKit大鼠原片段F1+2規(guī)格:96T/48T
龍血素A Loureirin A 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 活體細(xì)胞組織蛋白酶K(CATHEPSINK)活性原位熒光染色檢測試劑盒20
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。