上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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公司信息
- 聯(lián)系人:
- 陳經(jīng)理
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- 上海閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈B102
- 郵編:
- 200000
- 個性化:
- www.shbhbio-e.com
參考價 | ¥2500 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
1×106 | 2500元 | 25 件 可售 |
更新時間:2024-01-22 14:06:02瀏覽次數(shù):551
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
1、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
RWPE-2 人前列腺正常細胞 | 1×106 | P-X938 |
一、商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | RWPE-2 人前列腺正常細胞 |
種屬 | 人 |
細胞別稱 | RWPE-2;人前列腺正常細胞 |
年齡性別 | 男,54歲 |
生長特性 | 貼壁生長 |
組織來源 | 前列腺正常細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
背景簡介 | RWPE-2細胞是由Webber·M·M于1996年建株,該細胞來源于54歲白人男性。源于正常成人前列腺周邊組織的上皮細胞經(jīng)過轉(zhuǎn)染HPV-18后建系得到該細胞株。在三維基質(zhì)膠培養(yǎng)時,在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA(kallikrein 3, KLK3)。來源于RWPE-1的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2細胞株和 RWPE2-W99細胞株。同時,用N-甲醇-N-處理RWPE-1,建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的?掘? |
生物安全等級 | 2 |
細胞規(guī)格 | 1×106 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達情況 | cytokeratin 18, cytokeratin 8 |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-11610 |
培養(yǎng)基 | K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
倍增時間 |
2、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CM-H020人胰島β細胞培養(yǎng)基100mL 大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA 試劑盒 CP/CER(Mouse Ceruloplasmin) 小鼠銅藍蛋白 96T
Neurogenin 2: 神經(jīng)元素2抗體 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
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Phospho-Jak3 (Tyr980 + Tyr981): 0酸化蛋白酪酸激酶JAK-3抗體 CSC, 小鼠心肌細胞 人小腸頸部表皮樣癌細胞,Ca Ski細胞 F81(貓腎細胞)
RWPE-2 人前列腺正常細胞RNF150: 環(huán)指蛋白150抗體 A-375(人惡性黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
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RANTES: T細胞特異性趨化因子抗體 CL-0229T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 大鼠YY肽(PYY)ELISA試劑盒 RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) 人ras同源物基因家族成員b 96T
RAGE: 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。