上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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- 郵編:
- 200000
- 個(gè)性化:
- www.shbhbio-e.com
參考價(jià) | ¥ 4988 | ¥ 3288 |
訂貨量 | 1盒 | 10盒 |
- 型號(hào) 50T
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2023-10-30 13:16:52瀏覽次數(shù):563
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訂購信息:
產(chǎn)品名稱:豬傳染性胃腸炎病毒核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96634
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-71酸氫二鈉七水 phosphate, dibasic, heptahydrate>98%,BR
SW-13細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]dATP溶液(100 mM)dATP 100 mM solution>97%,BR
小鼠肝癌瘤株;H22癸酸鈉 decanoate>99%,進(jìn)分
SPARC Others Human SPARC / Osteonectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 瓊脂糖(美侖電泳級(jí))Agarose美侖,電泳級(jí)
髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy瓊脂糖(Sigma)AgaroseSigma原裝
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-()HPLC>98%,,還原型Glutathione (Reduced)
CL-0338G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(氧化型)度大于98%,BRGlutathione(Oxidized)
ESAM Others Mouse 小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DL-異>99%,BRDL-Isoleucine
小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLL--γ-芐酯0.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester
Eca-109食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBSL-苯芐酯鹽酸鹽0.98L-Phenylalanine benzyl ester
豬傳染性胃腸炎病毒核酸檢測試劑盒小腦顆粒細(xì)胞HCGC2-(2-羥苯基)苯并惡唑(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole
CD276 Others Human CD276 / B7-H3 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5,6-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))>98.0%(GC)5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole
L929 小鼠成纖維細(xì)胞2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole
CM-H043肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)1-Aminopyrene
SK-MEL-1, 皮膚色素瘤細(xì)胞2,5-二溴噻唑(>97.0%(GC))>97.0%(GC)2,5-Dibromothiazole