上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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更新時間:2023-11-05 08:32:26瀏覽次數(shù):630
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多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
樣本采集、存放及運輸:
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
DHCR7 7脫氫還原酶抗體
Dbx2 大腦發(fā)育同源蛋白2抗體
DEGS1 退行性精母細胞同源物1抗體
DSCC1 DSCC1蛋白抗體
DcR2 誘捕受體2抗體
DMAP1 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶相關蛋白1抗體
DMC1 減數(shù)分裂同源蛋白DMC1抗體
DNA Ligase III DNA連接酶3抗體
phospho-DNA PKcs (Thr2638) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體
phospho-DNA PKcs (Thr2647) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體
DNA polymerase delta p50 DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗體
DNA Polymerase delta, catalytic subunit DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體
DNA polymerase eta DNA聚合酶η抗體
DNA Polymerase gamma DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體
DNA Polymerase iota DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體
DNA Polymerase Kappa/POLK DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體
DNA Polymerase lambda DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗體
DNA polymerase mu DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體
DNAJA2 細胞周期蛋白3抗體
DNAJC9 DNAJC9蛋白抗體
Dnmt2 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶2抗體
Dnmt3L DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3L抗體
DPP10 二肽基肽酶10抗體
DPP3 二肽氨基肽酶3抗體
DREF DNA復制相關元件結合因子抗體
DRIL1 B淋巴細胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關蛋白DRIL1抗體
DRIP130 轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體
Drosha 核糖核酸酶3/Drosha抗體
DTYMK 脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒說明書DUSP10 雙特異性蛋白磷酸酶10抗體
DUSP5 雙特異性蛋白磷酸酶5抗體
phospho-Dynamin 1 (Ser774) 磷酸化酶動力蛋白1抗體
Dynamin 1 酶動力蛋白1抗體
phospho-Dynamin 1 (Ser778) 磷酸化酶動力蛋白1抗體
Dynorphin A 腦啡肽A抗體
DMWD 強直性肌營養(yǎng)不良相關蛋白9抗體
DYX1C1 DYX1C1蛋白抗體
DZIP3 E3泛素蛋白連接酶dzip3抗體