上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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更新時(shí)間:2023-11-05 18:56:33瀏覽次數(shù):447
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | lepidii |
貨號(hào) | BH-P99954 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過(guò)程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請(qǐng)保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性;2.多重反應(yīng)(高通量);3.反應(yīng)體系配置,無(wú)需冰塊;4.無(wú)懼高GC含量PCR;5.預(yù)防交叉污染;6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
LTPEP-a-2 人肺腺癌細(xì)胞三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)Tricyclazol solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
MDA-MB-453人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-453 L-15+10%FBS氟樂(lè)靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)Trifluralin solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
RETN Protein Mouse 重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)草達(dá)津(標(biāo)準(zhǔn)品)Trietazine質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human阿克泰(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)Thiamethoxam質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
小鼠腹脊髓神經(jīng)元MN-vsc三唑酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%)Triadimefon質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%
大鼠胎兒成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL bromide質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
Vero非洲綠猴腎細(xì)胞 Vero the African green monkey kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSD-α-氨基己二酸D-a-Aminoadipic acid質(zhì)量規(guī)格:0.97
IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白 (His 標(biāo)簽)D-高苯D-Homophenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>90%(T),BR
L W-3A(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細(xì)胞)D-焦D-Pyroglutamic acid質(zhì)量規(guī)格:0.98
膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-環(huán)丙基D-Cyclopropylalanine質(zhì)量規(guī)格:BR
WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞胭脂紅質(zhì)量規(guī)格:BS,用于生物學(xué)染色Carmine
CM-R073大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL溴酚紅質(zhì)量規(guī)格:ARBromophenol red
FGFR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫鋅酸質(zhì)量規(guī)格:>98%Alphalipoic acid
小鼠腦膜細(xì)胞MMenC(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Alphalipoic acid
JAR細(xì)胞,人胎盤絨毛癌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞,C3H 10T1/2 2A6細(xì)胞 人纖維環(huán)細(xì)胞HAFC質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAmbroxol HCl
葶藶子探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒*胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)促腎上腺皮質(zhì)激素(1-13),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-13), human
F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-16),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-16), human
NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-17),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-17), hu