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上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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公司信息
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- 陳經(jīng)理
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- 上海閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈B102
- 郵編：
- 200000
- 個(gè)性化：
- www.shbhbio-e.com
| 參考價(jià) | ￥1560-￥7020 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 300μg | 1560元 | 15 盒 可售 |
| 3mg | 7020元 | 15 盒 可售 |
更新時(shí)間：2023-11-07 17:45:46瀏覽次數(shù)：622
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
商品屬性
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
P-PR1402 | T4 UvsX Recombinase | 300μg |
P-PR1402 | T4 UvsX Recombinase | 3mg |
產(chǎn)品介紹：
UvsX 重組酶，來源于 T4 噬菌體，是 RecA/Rad51家族的同源體。RecA/Rad51 重組酶家族在雙鏈 DNA 斷裂的無誤修復(fù)和復(fù)制叉重新啟動(dòng)的過程中起到重要作用。
T4 UvsX 重組酶可與其他重組酶一起錨定在單鏈 DNA 上并激活其在其他雙鏈 DNA 上尋找同源序列，以進(jìn)一步完成鏈置換。經(jīng)檢測(cè)，該酶無核酸酶活性。
儲(chǔ)存：
置于-20°C 可保存 1 年，-80°C 長期保存，短期使用置于 4°C，保存一個(gè)月，避免反復(fù)凍融。
熱失活：60°C，10min。
酶儲(chǔ)存液：50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM
EDTA, 10% Trehalose, pH 7.5。2xRPA BufferMix：包含反應(yīng)緩沖鹽、ATP、磷酸肌酸、dNTP、PEG、DTT、BSA 等，可用于 RPA 擴(kuò)增試驗(yàn)。該試劑 4°C
條件下放置 1 個(gè)月性能無下降。
基于本蛋白進(jìn)行 RPA 反應(yīng)測(cè)試的全套試劑
用于 RPA 擴(kuò)增的測(cè)試引物與探針
CPV-F（20uM） CACTTACTAAGAACAGGTGATGAATTTGCTACAG
CPV-R（20uM） AGTTTGTATTTCCCATTTGAGTTACACCACGTCT
Probe（10uM） CCTCAAGCTGAAGGAGGTACTAACTTTGGT[dT-BHQ1]
[THF][dT-FAM]ATAGGAGTTCAACAAG -(C3)
Canine parvovirus type 2,VP2
加入 1μl 的模板 DNA，上機(jī)反應(yīng)前加入 1.25 μl 的 280 mMMg(OAC)2（終濃度 14 mM），總反應(yīng)體積 25 μl。混合均勻，并離心，置于 39-42℃條件下反應(yīng) 30min。
2. 進(jìn)行熒光 RPA 擴(kuò)增在進(jìn)行熒光檢測(cè)時(shí)體系中，額外加入 0.3 μl 的 10μM Probe（120 nM的終濃度）和 50U 的 Exonuclease III（2U/μl 的終濃度），即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。本方法應(yīng)用原理為 ExoIII 切割 THF 位點(diǎn)，使熒光與猝滅基團(tuán)分離，報(bào)告熒光信號(hào)。
特別說明：
（1） 以上 RPA 擴(kuò)增測(cè)試屬于蛋白功能性測(cè)試，按照以上實(shí)驗(yàn)操作流程，可獲得 RPA 擴(kuò)增產(chǎn)物。進(jìn)一步的優(yōu)化，包括：X、Y、GP32、聚合酶、反應(yīng) Buffer，甚至加樣順序，均可能進(jìn)一步提高 RPA 的擴(kuò)增性能。
（2）關(guān)于 DNA 聚合酶的選擇， 測(cè)試了三種常見的 DNA聚合酶，在進(jìn)行熒光法測(cè)定時(shí)，推薦的選擇順序依次為 Bst 4.0>Bsu> Sau，且在 42℃條件下，總能獲得最快的擴(kuò)增速度，且熒光信號(hào)更強(qiáng)。在 Basic 擴(kuò)增中 Sau 表現(xiàn)出特異性擴(kuò)增能力更佳。
（3）關(guān)于 RPA 的靈敏度與非特異擴(kuò)增，在 Basic 試劑的擴(kuò)增中，仍然存在非特異擴(kuò)增產(chǎn)物，這需要進(jìn)一步優(yōu)化反應(yīng)組分及引物序列。在使用熒光探針法時(shí)，但由于特異性探針的存在，非特異擴(kuò)增產(chǎn)物通常無熒光信號(hào)值，但此時(shí)會(huì)影響檢測(cè)靈敏度。GP32 蛋白的
濃度增加會(huì)顯著降低非特異性擴(kuò)增，但會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增速度減緩，此時(shí)需要同步增加 X 與 Y 蛋白的用量，以維持 RPA 的擴(kuò)增速度。
（4）據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在進(jìn)行試紙條 RPA 實(shí)驗(yàn)時(shí)，傾向使用 Nfo 內(nèi)切酶又名 Endonuclease IV， 來對(duì)擴(kuò)增探針進(jìn)行切割，但 未予測(cè)試，目前無法提供相應(yīng)參數(shù)。
（5）RPA 反應(yīng) Buffer 對(duì)擴(kuò)增至關(guān)重要，輕微的濃度差異，均可導(dǎo)致擴(kuò)增效率大幅下降，甚至失敗。RPA BufferMix 為粘稠試劑，使用時(shí)務(wù)必保證加樣準(zhǔn)確，Tip 頭中的殘液務(wù)必打入 EP 管中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
EL ELISA Kit | 指環(huán)蟲屬通用PCR試劑盒 |
HD ELISA Kit | ACTN-4 ELISA Kit |
Vitamin A，VA ELISA Kit | Vertnin(VRTN)ELISA Kit |
acetylcholine receptor antibody，AChRab ELISA Kit | 組β溶血性鏈球菌（A組乙型溶血性鏈球菌）PCR試劑盒 |
TG ELISA Kit | 丙型肝炎病毒3型RT-PCR試劑盒 |
ACE ELISA Kit | 麥芽香肉桿菌PCR試劑盒 |
VZV-IgG ELISA Kit | 大腸彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Activin AB(ACVAB)ELISA Kit | 同牛皰疹病毒型牛皰疹乳頭炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
HIF-1α ELISA Kit | 豬副粘病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Vitamin A，VA ELISA Kit | 鼻咽癌病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
DPPⅣ ELISA Kit | 鞭蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
visfatin ELISA Kit | 豬附紅細(xì)胞體PCR試劑盒 |
Activin B(ACVB)ELISA Kit | CGRP 小鼠降鈣su基因相關(guān)肽ELISA檢測(cè)試劑盒 |
HIF-1α ELISA Kit | 70kDa熱休克蛋白1B(HSPA1B)ELISA試劑盒 |
周期su依賴性激4(CDK4)ELISA試劑盒 | 88kDa核孔蛋白(NUP88)ELISA試劑盒 |
