上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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參考價 | ¥ 4988 | ¥ 3288 |
訂貨量 | 1 件 | 10 件 |
- 型號
- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間:2023-11-08 13:13:24瀏覽次數(shù):666
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訂購信息:
產(chǎn)品名稱:胡寧病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號:BH-P96486
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
長尾綠猴腎細胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide>99%,EP
TEK Others Human Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氯化鎂六水(分子生物學)Magnesium chloride, hexahydrate>99%,分子生物學級
CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC
LX-2, 肝星形細胞株 小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素),GT1.1細胞 OK(負鼠(opossum)腎細胞)神經(jīng)氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens≥10 units/ mg
腎透明細胞腺癌細胞;786-O [786-0]乙酸鎳四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate>98%,BC
小鼠成骨細胞*培養(yǎng)基 100mLDL-α-羥基戊二酸二鈉98%,GC,進分sigma 94577DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt
P388D1小鼠樣瘤細胞 P388D1 mouse lymphoid tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+90%馬血清+10%FBS地美溴胺>99%,BRDemecarium Bromide
IL12B Protein Human 重組 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標簽)喹哪啶紅ARQuinaldine Red
腦微血管內(nèi)皮細胞 (HBMEC) ( 5×105 ) 大鼠主動脈平滑肌細胞 細胞名稱(98%)>98%Phenolphthalein
CM-R057大鼠腎系膜細胞*培養(yǎng)基100mL四溴酚藍INDTetrabromophenol blue
胡寧病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)293T細胞,胚腎T細胞 卵巢癌細胞,HO-8910細胞 心肌細胞裂解物HCML戈米辛D()>98.0% (LC&T),Gomisin D
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-11-甲基>98%1-Methyl Xanthine
IFNA5 Others Human IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 細胞裂解液 (陽性對照) 6-羧基-X-羅丹明>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX
豚鼠皮膚細胞;GP-S2西侖吉肽>97%,integrin抑制劑Cilengitide,EMD121974,NSC 707544
IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 細胞裂解液 (陽性對照) 柴胡皂苷B2()HPLC≥98%,Saikosaponin B2