訂購信息:
產(chǎn)品名稱:人博卡病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號:BH-P97211
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
上皮細(xì)胞總RNAHMEpiC NA聚酰胺粉(柱層析用,10-30目)Polyamide柱層析用,10-30目
CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydratefor HPLC, ≥99%(T)
HCT-15 結(jié)腸癌細(xì)胞(農(nóng)殘級) sulfate anhydrous農(nóng)殘級
CL-0401NCI-H446(小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrousfor HPLC,≥99.0%(T)
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞(for HPLC,≥99.0%) bicarbonatefor HPLC,≥99.0%
DPYS Others Human DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 抑氨肽酶(進(jìn)口)>99%,美國進(jìn)口sc-202975Bestatin,Ubenimex
軟骨細(xì)胞HC-a高藜蘆酸()HPLC≥98.0%(3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid
羅猴胎腎細(xì)胞;MA104 腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞 NCI-H446 [H446](小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)二乙酰一1(>98%,BR)>98%,BRDiacetyl monoxime
前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]馬來酸二乙酯(>98%,BR)>98%,BRDiethyl maleate
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二氫細(xì)胞弛素(>98%,BR)>98%,BRDihydrocytochalasin B
人博卡病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22草酸脫氫美國進(jìn)口Dehydro Amlodipine Oxalate
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr 腹水瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞 SVEC4-10細(xì)胞,小鼠結(jié)血管上皮樣細(xì)胞(R)-美國進(jìn)口(R)-Amlodipine
永生化表皮細(xì)胞;HaCaT阿瑞匹坦-標(biāo)記d4美國進(jìn)口Aprepitant - Labeled d4
CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿瑞匹坦-M3代謝物美國進(jìn)口Aprepitant-M3 Metabolite
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1OSI-420,游離堿(去甲埃羅替尼)美國進(jìn)口OSI-420, Free Base (Desmethyl Erlotinib)
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。