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Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒,微板法
Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒,微板法
參考價(jià)1220-1350
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Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒,微板法
谷*酸脫氫酶廣泛分布于生物體中,在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮化合物的代謝中起重要作 用。其輔酶是 NADH 或 NADPH,在動(dòng)植物種兩種輔酶都有存在

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒,微板法

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒,微板法

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 谷*酸脫氫酶廣泛分布于生物體中,在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮化合物的代謝中起重要作 用。其輔酶是 NADH NADPH,在動(dòng)植物種兩種輔酶都有存在,而以 NADH-谷*酸脫氫 酶(EC 1.4.1.2)活力為主。 本試劑盒提供一種快速靈敏的檢測(cè)方法,樣品中的 NADH-谷*酸脫氫酶特異性作用于底 物谷*酸并產(chǎn)生 NADH,同時(shí)與顯色劑反應(yīng)生成黃色物質(zhì),該物質(zhì)在 450nm 處有吸收 峰,進(jìn)而得到 NADH-GDH 的酶活性大小。 二、試劑盒的組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 液體70mL×14℃保存 試劑一 液體10mL×14℃保存 濃度為1M 試劑二 液體5mL×14℃保存 試劑三 液體2.2mL×14℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑mg×14℃保存 若重新做標(biāo)曲,則用到該試劑 注:粉劑量在 mg 級(jí)別,使用前用手甩幾次或者進(jìn)行離心,打開直接加入要求的試劑即可。 三、所需的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、 研缽、冰和蒸餾水。 四、NADH-谷*酸脫氫酶(NADH-GDH)活性測(cè)定: 1、樣本制備: ① 組織樣本: 稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液,進(jìn)行冰浴勻漿。12000rpm 4℃離心 10min,取上清 液,置冰上待測(cè)。(或按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提?。?② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液; 超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。(或按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL500~10001 的比例進(jìn)行提取) ③ 液體樣本:直接檢測(cè)。 2、上機(jī)檢測(cè)① 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 450nm,蒸餾水調(diào)零。 ② 在 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中依次加入: 試劑名稱(μL測(cè)定管 提取液 320 試劑一 200 試劑二 80 樣本 160 試劑三 40 混勻,立即 450nm 下讀取 A1 值,15min 后讀取 A2 值。ΔA=A 2-A1。



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