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蔬菜中硝酸鹽含量試劑盒,微板法
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蔬菜中硝酸鹽含量試劑盒,微板法
用 pH9.6~9.7 堿性緩沖液提取樣品中硝酸根離子,同時(shí)加活性炭去除色素類,加沉 淀劑去除蛋白質(zhì)及其他干擾物質(zhì)

蔬菜中硝酸鹽含量試劑盒,微板法

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本試劑盒僅供科研使用 1 蔬菜中硝酸鹽含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū) (貨號(hào):WS0440W 微板法 96 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: pH9.69.7 堿性緩沖液提取樣品中硝酸根離子,同時(shí)加活性炭去除色素類,加沉 淀劑去除蛋白質(zhì)及其他干擾物質(zhì),利用硝酸根離子和亞硝酸根離子在紫外區(qū) 219nm 具有等吸收波長(zhǎng)的特性,測(cè)定提取液的吸光度,其測(cè)得結(jié)果為硝酸鹽和亞硝酸鹽吸光度 的總體,鑒于新鮮蔬菜、水果中亞硝酸鹽含量甚微,可忽略不計(jì)。測(cè)定結(jié)果為硝酸鹽的 吸光度,依據(jù)從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出硝酸鹽含量。 二、試劑盒的組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格試劑名稱 保存要求 備注 活性炭 1g×1 室溫 試劑一 液體 6mL×1 4℃保存 試劑二 液體 2mL×1 4℃保存 試劑三 液體 2mL×1 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 液體×1 4℃保存 若重新做標(biāo)曲,則用到該試劑 三、所需的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 UV 板(用于紫外光波長(zhǎng)下的測(cè)定)、蒸餾水、常溫離心機(jī),可調(diào)式往返 振蕩機(jī)。 四、蔬菜中硝酸鹽含量測(cè)定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解樣本自身情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本處理: ① 組織樣本:取 0.2g 組織樣本(若樣本較大可研磨粉碎后取樣),加 1mL 的蒸餾水 研磨勻漿,全部轉(zhuǎn)移至 2mLEP 管中,再依次加入 0.06mL 試劑一和 10mg 的活性炭 混勻,放置于可調(diào)式往返振蕩機(jī)上(200 /min)振蕩 30min(如無(wú)此儀器需間隔 3min 手動(dòng)晃動(dòng)幾秒)。再依次加入 0.02mL 的試劑二和 0.02mL 的試劑三,充分混勻,加 0.9mL 蒸餾水定容至 2mL,混勻后室溫放置 5min。12000rpm 室溫離心 5min,澄清 的上清液做為樣本待檢上清液;空白待檢上清液制備過(guò)程除了不加樣本之外,其他 操作步驟同組織樣本制備過(guò)程。 2、上機(jī)檢測(cè): 1 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上。 2 96 UV 板中依次加入: 試劑名稱(μL) 測(cè)定管 空白管(僅做一次) 樣本待檢測(cè)上清液 200 空白待檢測(cè)上清液 200 混勻, 于 219nm 分別讀吸光值 A,A=A 測(cè)定管-A 空白管。 【注】 若 A 值超過(guò) 1.2,可用蒸餾水對(duì)待檢上清液稀釋,稀釋倍數(shù) D 代入計(jì)算公式重新計(jì)算; 五、結(jié)果計(jì)算: 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:y = 0.0348x + 0.0029x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/mL),y 為吸光值A。本試劑盒僅供科研使用 2 2、蔬菜中硝酸鹽(NO3 -)含量(μg/g mg/Kg)=(A-0.0029)÷ 0.0348×V×D÷W =28.74×(A-0.0029)×V×D÷W V---最終待測(cè)總體積,2mL; W---取樣質(zhì)量,g; D---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于新鮮蔬菜及水果中硝酸鹽含量的測(cè)定。本方法檢出限為 1.2mg/kg。 附:標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程: 1 標(biāo)準(zhǔn)品母液(500μg/mL): 2 用蒸餾水把母液稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 4, 8, 12,16, 20. μg/mL。也可根據(jù) 實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 直接取 200μL 不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品至 96 UV 板中,于 219nm 分別讀吸光值 A,根 據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。



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