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南京億迅生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 質(zhì)控樣品,人工血清,人工胃液,elisa試劑盒,化學(xué)試劑,生物試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥ 1000 | ￥ 750 |
| 訂貨量 | 1 件 | 5 件 |
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更新時(shí)間：2019-11-07 13:30:32瀏覽次數(shù)：552
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紅霉素-N-脫甲基酶(ERND)檢測(cè)試劑盒
測(cè)定原理：
ERND催化紅霉素釋放甲醛，通過(guò)Nash比色測(cè)定甲醛含量，即可計(jì)算出ERND活性。
自備儀器和用品：
普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和冰。
試劑組成和配置：
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加100mL蒸餾水溶解。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1管，4℃保存。臨用前加1mL蒸餾水，充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加0.5mL蒸餾水，充分溶解。
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前，加蒸餾水4.5mL充分溶解。
試劑六：液體×1瓶，4℃保存。
試劑七：液體×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1瓶，-20℃保存。臨用前取1.5mL EP 管，加入10μl標(biāo)準(zhǔn)液，加990μl蒸餾水，混勻即為0.05 mmol/L標(biāo)準(zhǔn)甲醛溶液，4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、除去細(xì)胞核，線粒體等大分子物質(zhì)：稱約0.5g組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃離心30min，取上清液，轉(zhuǎn)入超速離心管中。
2、粗制微粒體：100 000g，4℃，離心60min，棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質(zhì)：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。
4、終微粒體：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5mL，充分震蕩溶解，即粗酶液，待測(cè)。該待測(cè)液需當(dāng)天使用。
測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管：取0.5mL EP管，加入10μL粗酶液，170μL試劑二，10μL試劑三，10μL蒸餾水，混勻后置于37℃水浴保溫30min；立即加入35μL試劑五，混勻后置于冰浴中5min；取出后加入35μL試劑六，混勻后室溫靜置5min；室溫8000rpm離心5min；取新的EP管，加入100μL上清液，100μL試劑七，混勻后60℃水浴10min，然后取出，用冷水冷卻5min，于412nm測(cè)定光吸收，記為A空白管。每個(gè)樣品都需要做空白管。
4. 測(cè)定管：取0.5mL EP管，加入10μL粗酶液，170μL試劑二，10μL試劑三，10μL試劑四，混勻后置于37℃水浴保溫30min；立即加入35μL試劑五，混勻后置于冰浴中5min；取出后加入35μL試劑六，混勻后室溫靜置5min；室溫8000rpm離心5min；取新EP管，加入100μL上清液，100μL試劑七，混勻后60℃水浴10min，然后取出，用冷水冷卻5min，于412nm測(cè)定光吸收，記為A測(cè)定管。
5. 標(biāo)準(zhǔn)管：取0.5mL EP管，加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品，100μL試劑七，混勻后60℃水浴10min，然后取出，用冷水冷卻5min，于412nm測(cè)定光吸收，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
紅霉素-N-脫甲基酶(ERND)檢測(cè)試劑盒
